Estudio del mecanismo de acción del compuesto pro-apoptótico tiosemicarbazona de la 4,4?-dimetoxibenzofenona en modelos de leucemia aguda humana

M. CABRERA; N. GOMEZ; F. REMES LENICOV; A. MOGLIONI; C. SHAYO; N. FERNANDEZ; C. DAVIO

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión científica Anual de la SAIC; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El tratamiento de las leucemias agudas humanas continúa siendo un desafío al presente. Resultados previos permitieron identificar al compuesto tiosemicarbazona (TSC) de la 4,4?dimetoxibenzofenona (T44Bf) como un inductor selectivo de apoptosis en un panel de líneas celulares utilizadas como modelos de leucemia aguda humana (KG1a, HL60, U937 y Jurkat). El presente trabajo tiene como objetivo la identificación de las vías de señalización y el mecanismo de acción involucrado en la actividad pro-apoptótica de T44Bf. Entre los mecanismos de acción descriptos para los compuestos pertenecientes a las TSC se encuentra la inducción de especies reactivas de oxígeno (ROS) y la intercalación al ADN. Los resultados obtenidos en ensayos de estrés oxidativo y movilidad electroforética mostraron que la actividad pro-apoptótica de T44Bf no involucra ninguno de estos mecanismos. En ensayos de Western Blot observamos que T44Bf induce la fosforilación de la proteína antiapoptótica Bcl-2 a partir de las 2h de tratamiento y de manera sostenida hasta las 24h. Numerosos trabajos indican una asociación entre la fosforilación de Bcl-2 y el pasaje a través de las distintas fases del ciclo celular. Mediante citometría de flujo observamos un arresto de las células en la fase G2/M luego del tratamiento con T44Bf en las líneas leucémicas ensayadas. Dado el papel de Bcl-2 en el mantenimiento de la integridad mitocondrial evaluamos el potencial de membrana mitocondrial en estos sistemas y observamos una pérdida del mismo a las 7h de tratamiento alcanzando valores de 35±2 % (p