EFECTO ANTITUMORAL DE AGONISTAS DEL RECEPTOR A HISTAMINA H4 EN LA LÍNEA CELULAR WIDR DE CÁNCER COLORRECTAL

PABLO CIRAOLO; DIEGO MARTINEL LAMAS; JORGE CORTINA; MONDILLO CAROLINA; ELENA RIVERA; VANINA MEDINA

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la SAIC, Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013

El cáncer colorrectal (CCR) es el tercer cáncer más frecuente en nuestro país. Se ha demostrado previamente que los niveles de expresión del receptor a histamina H4 (RH4) están disminuidos en CCR avanzado respecto de estadios iniciales, lo que sugiere que la expresión del RH4 se regula durante la progresión de esta enfermedad. El objetivo de este trabajo fue investigar el efecto de agonistas del RH4 sobre el potencial proliferativo de la línea celular de CCR humana WiDr. Se determinaron: la expresión del RH4 por western blot e inmunocitoquímica, la acumulación de AMPc por RIA, la proliferación mediante el ensayo clonogénico e incorporación de BrdU, la apoptosis mediante el ensayo de TUNEL y Anexina-V, las especies reactivas del oxígeno (ROS) se evaluaron por citometría de flujo y los marcadores del daño al ADN (γH2AX y 8-OHdG) se determinaron por inmunocitoquímica, empleando agonistas del RH4 [Histamina (HA), Clozapina (CLZ), JNJ28610244 (J28)] y el antagonista JNJ7777120. Los agonistas del RH4 reducen la proliferación de las células WiDr en forma dosis dependiente, con una concentración inhibitoria del 50% (CI50) de 1.1±0.7 µM para CLZ; 1.9±0.6 µM para J28. Este efecto se asoció a una reducción en el porcentaje de incorporación de BrdU [31.3±0.6 (CLZ), 31.6±1.0 (J28) vs. 41.3±2.4, P<0.01)] que se revirtió con el tratamiento combinado con el antagonista y a un aumento de la apoptosis (3-veces, P<0.01). Además, estos ligandos producen un aumento significativo de los niveles de ROS (2.5-veces, P<0.01) y aumentan el número de foci de γH2AX por núcleo. Estos agonistas del RH4 fueron más efectivos en inhibir la proliferación que la histamina y no se observó actividad mitogénica luego del tratamiento con agonistas del RH1 (2-(3-(trifluorometil)fenil)histamina), RH2 (antamina) o RH3 (R(-)-α-metilhistamina). Podemos concluir que las células WiDr de CCR presentan una expresión funcional del RH4 y que agonistas de estos receptores exhiben una actividad antitumoral.