Relación entre la estructura de distintas 4-metil-cumarinas y la inducción de apoptosis en células leucémicas humanas.

RIVEIRO M.E; MAES D; MOGLIONI A; GÓMEZ N; VÁZQUEZ R; DE KIMPE N; SHAYO C; DAVIO C

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Inmunología

La utilización de agentes inductores de apoptosis es una opción promisoria para el tratamiento de leucemias humanas. Previamente hemos descripto que ciertas 6,7- o 7,8- dihidroxicumarinas o compuestos derivados del ácido cinámico eran inductores de apoptosis en células leucémicas humanas. Con el objetivo de describir nuevos fármacos con posible aplicación terapéutica, hemos profundizado los estudios de relación estructura/actividad. Para ello, se ensayaron distintos compuestos sintéticos donde se introdujeron distintos grupos funcionales en ciertas posiciones del sistema cumarínico y se determinó la capacidad de inducir apoptosis en la línea leucémica humana U-937. Se determinó la inhibición de la proliferación por incorporación de [3H]timidina (CI50) y la citotoxicidad por tinción con Azul Tripán (CC50) a las 48 h de tratamiento. La inducción de apoptosis se determinó por fragmentación del ADN y tinción nuclear con Hoescht 33342 e Ioduro de Propidio. Los compuestos ensayados fueron: 7,8-dihidroxi-4-metilcumarina (B2); 7-hidroxi-4-metilcumarina; 4,7-dimetil-cumarina; 4,8-dimetil-cumarina; 4,6-dimetil-cumarina; 7-metoxi-4-metilcumarina; 7-hidroxi-4-(trifluormetil)-cumarina; 7-amino-4-metilcumarina y Cumarina. Los resultados obtenidos indican que la cumarina B2 es capaz de inducir disminución de la proliferación celular debido a la inducción de apoptosis. En cambio, las restantes cumarinas sintéticas estructuralmente relacionadas a B2 no son capaces de inducir apoptosis en la línea celular U-937. Estos resultados indican que la presencia de grupos oxidrilos libres en posición orto en el núcleo cumarínico es esencial para la inducción de apoptosis. (1) Se observa condensación de la cromatina, colapso nuclear y cuerpos apoptóticos.   CI50  CC50  Fragmentación del ADN (250 microM)  Tinción nuclear (250 microM)  B2  74.33 +/- 1.23 microM  125.20 +/- 1.47 microM  Positivo  Positivo (1)  Otras cumarinas ensayadas  > 2.00 mM  > 2.50 mM  Negativo  Negativo