Farmacodinamia de 7,8-dihidroxi-4-metilcumarina en la inducción de apoptosis en células leucémicas humanas

RIVEIRO M.E; MOGLIONI A; FACORRO G; PIEHL L; RUBIN DE CELIS E; BALDI A; SHAYO C; DAVIO C

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Inmunología

En búsqueda de compuestos con actividad inductora de apoptosis en células leucémicas humanas, hemos descripto que el compuesto 7,8-dihidroxi-4-metilcumarina (B2) inhibe la proliferación de la línea leucémica U-937 (IC50=74,33±1,23 μM) debido a la inducción de apoptosis.Con el objetivo de profundizar en el estudio del mecanismo de acción apoptótico, abordamos el estudio de distintas vías de señalización asociadas a este proceso. La activación de la vía de MAPKs fue visualizada en experimentos de western blot utilizando anticuerpos específicos para las proteínas fosforiladas. Los resultados señalan que la vía de ERK no se ve afectada por el tratamiento con B2 250 μM, mientras que la vía de p38 y JNK se regulan a tiempos cortos de tratamiento con la misma concentración. Por otra parte, se observó modulación en los niveles intracelulares de pAkt. Asimismo, se estudió la modulación de los protooncogenes c-myc y c-fos, relacionados con los procesos de proliferación celular de la línea U-937. Luego de 6 h de tratamiento con B2 se observó una disminución en los niveles de c-myc, mientras que los niveles de c-fos no son afectados. Finalmente, empleando la técnica de resonancia paramagnética electrónica, hemos detectado la formación de un radical fenoxilo luego del tratamiento de las células U-937 con B2 250 μM.Por otro lado, B2 también indujo apoptosis en la línea mieloide leucémica HL-60, que se caracteriza por presentar la proteína p53 truncada. Esto indicaría que la inducción de apoptosis es independiente de este vía, característica muy ventajosa, para el desarrollo de fármacos anti-neoplásicos.Estos resultados indican que B2 es capaz de generar un radical libre fenoxilo y de modular las vías de p38, JNK y AKT. Por otra parte la inducción de apoptosis es independiente de p53 señalando que el núcleo cumarínico representaría un prototipo farmacológico para el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos en el tratamiento de leucemias.