Formas Fosforiladas del Receptor de Glucocorticoides en la Retina

MARQUIONI-RAMELLA M; MARAZITA M; GALIGNIANA MD; SUBURO AM

Congreso; LVIII Reunión Anual de SAIC; 2013

El receptor de glucocorticoides (GR) puede ser fosforilado en diversas serinas. A nivel de Ser211 (p-Ser211-GR), la fosforilación requiere la unión al ligando, que no es necesaria para la fosforilación de Ser203 (p-Ser203-GR). Previamente sugerimos que los glucocorticoides (GC) podrían tener un efecto directo sobre los segmentos externos de los fotorreceptores, por lo que aquí analizamos estas formas fosforiladas bajo distintas condiciones de iluminación. Se emplearon ratones Balb-c, hembras, de 5-7 semanas de edad, criados bajo iluminación cíclica (12 hs 60 lux: 12 hs oscuridad). Se tomaron muestras a mediodía y después de exposición a oscuridad prolongada (OP, 7 días). Se hicieron Western blots de retinas totales o de segmentos externos (SE) aislados en horario diurno. También se efectuaron estudios inmunoenzimáticos o inmunofluorescentes, utilizándose anticuerpos contra GR, p-Ser211-GR, p-Ser203-GR, FKBP52, una inmunofilina asociada a GR, y tubulina. En los Western blots de retinas enteras se observó inmunorreactividad (IR) para GR, p-Ser203-GR y p-Ser211-GR, pero en los SE sólo se visualizaron GR y p-Ser203-GR. En los cortes de retina se observó GR-IR en todos los núcleos celulares y en los terminales sinápticos de la capa plexiforme externa (CPE). La p-Ser211-GR-IR era exclusivamente nuclear. No se detectaron cambios significativos asociados a la iluminación. p-Ser203-GR-IR apareció en los SE y en la CPE, junto con FKBP52-IR. Ambos marcadores se modificaron según las condiciones de iluminación, aumentando después de OP. La presencia de GR- y p-Ser203-GR-IR apoya la hipótesis de una acción directa de los GC sobre los SE y el pedículo sináptico de los fotorreceptores. Los cambios inducidos por la oscuridad sugieren que p-Ser203-GR podría modular la supervivencia de los fotorreceptores en ambientes fototóxicos, tal vez en forma no-genómica.