Regulación de la actividad de proteasas en la glándula mamaria en la transición de lactogénesis I a lactogénesis II

URSULA BUSSMANN, LEONARDO BUSSMANN

Mar del Plata

Congreso; LI Congreso de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC); 2006

La remodelación tisular cumple un rol esencial en la fisiología mamaria, estando en ella involucradas diversas proteasas. El objetivo de este trabajo fue por lo tanto estudiar la posible modulación de estas enzimas en la glándula mamaria durante la diferenciación al final de la preñez. Se utilizó ratas preñadas en el día 19 (P19) u ovariectomizadas (Ovx), con o sin el tratamiento de reemplazo con esteroides ováricos (E2 o P4). Mediante distintos zimogramas realizados con las proteínas aisladas de mama total se estudió la presencia y actividad de proteasas metalodependientes (MMP) y serina-proteasas como activadores del plasminógeno (PA). Se observó 2 bandas de actividad gelatinolítica, una de 66 kDa correspondiente a la MMP-2 y otra de 76 kDa correspondiente a la proenzima. La actividad de MMP-2 aumentó (31.6±0.4)% en las mamas diferenciadas por la Ovx vs. P19 (p< 0.001), incrementando (26±1)% al administrar E2 (p< 0.001, Ovx vs Ovx+E2). El tratamiento con P4, que inhibe la diferenciación por Ovx, revirtió el efecto de ésta (p> 0.05; P19 vs Ovx+P4). La proMMP-2 mostró el doble de actividad lítica in vitro en las mamas no diferenciadas (p< 0.001). Por Northern Blots se observó que los transcriptos para MMP-2 y MMP-9 son altos en estro y diestro, disminuyen fuertemente en la preñez y bajan aún más con la Ovx vs. P19 (p< 0.001). Mediante zimogramas con caseína y plasminógeno se determinó la presencia de tres bandas de lisis. Una de 82 kDa que correspondería al tPA y no varía con la diferenciación de la mama (p> 0.05), otra de 43 kDa observable solo en las mamas diferenciadas o tratadas con E2 (correspondiente al uPA) y una banda mayoritaria (27 kDa) que mostró una actividad incrementada al doble cuando la glándula no es secretante (P19 y Ovx+P4, p< 0.001). Estos resultados indican una modulación de la actividad proteolítica y por lo tanto de la remodelación glandular por los esteroides ováricos en la transición de lactogénesis I a lactogénesis II.