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La proteína epididimaria de rata DE se asocia al espermatozoide durante la maduración existiendo una población débilmente unida que se libera durante la capacitación, y otra fuertemente unida que participa en la fusión de gametas. Mientras que la primera población se encuentra asociada por interacciones electro-estáticas, se desconoce el mecanismo de unión de la DE fuertemente unida. Recientes evidencias indican que la transferencia de proteínas integrales al espermatozoide estaría mediada por vesículas membranosas del fluido epididimario denominadas epididimosomas, por lo cual el objetivo del presente trabajo fue estudiar la participación de los mismos en la asociación fuerte de DE al espermatozoide. Para ello, fluidos epididimarios recuperados por perfusión desde el vaso deferente fueron sometidos a ultacentifugación, confirmándose la obtención de las vesículas por microscopía electrónica. La posible contaminación de la preparación con espermatozoides fue descartada por estudios de Western blot (Wb) con anti-tubulina como marcador celular. Posteriores ensayos de Wb con un anticuerpo específico contra DE confirmaron la presencia de la proteína en las vesículas.La unión de DE a las mismas se estudió por extracción de proteínas con diferentes tratamientos y posterior análisis por Wb, utilizando espermatozoides como control. Al igual que la población fuertemente unida a los espermatozoides, DE no fue removida de las vesículas por PBS, 2M NaCl o 5U/ml PLC-PI (fosfolipasa C específica para fosfatidilinositol), siendo totalmente extraída por 1% Tritón X-100. En conjunto, estos resultados demuestran la existencia de unapoblación de DE fuertemente unida a los epididimosomas, apoyando la participación de los mismos en el mecanismo por el cual DE se asocia fuertemente al espermatozoide durante su tránsito por el epidídimo.