IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Modulación por prostasomas de la fosforilación en tirosina durante la capacitación espermática
Autor/es:
LIDIA PIEHL; MARÍA LAURA FISCHMAN; HUMBERTO CISALE; PATRICIA V. MIRANDA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigacion Clinica
Resumen:
Los espermatozoides de mamífero deben residir
un tiempo en el tracto femenino, o ser incubados en condiciones especiales,
antes de poder fertilizar a un ovocito. En este tiempo, completan un proceso
denominado capacitación que, entre otras cosas, incluye una disminución del
colesterol de membrana y un aumento de la fosforilación en tirosina. Los
prostasomas son vesículas que se encuentran en
plasma seminal y han sido involucrados tanto en la estabilización como
en la activación de los espermatozoides. En el presente trabajo analizamos si
los prostasomas estaban relacionados con los cambios de fosforilación en
tirosina que ocurren durante la capacitación. Los prostasomas se aislaron de
semen de cerdo por ultracentrifugación y filtración molecular. Los
espermatozoides fueron incubados en medio Tyrode conteniendo 3 mg/ml de BSA en
presencia o ausencia de prostasomas. Luego de 3 hs de incubación a 39°C y con 5%CO2, se obtuvo un extracto total de
espermatozoides por tratamiento con 1% SDS y la fosforilación en tirosina fue
analizada por inmunoblot con un anticuerpo monoclonal específico. Los
espermatozoides sin tratamiento mostraron un set de bandas fosforiladas en
tirosina que no sufrieron modificaciones (30-85 kD). Por otro lado, la incubación de los espermatozoides en
condiciones capacitantes produjo un aumento en la fosforilación en tirosina de
diversos polipéptidos (18 - 230 kD) y también la defosforilación de una banda
de bajo peso molecular (<10 kD). La presencia de prostasomas durante la
incubación de los espermatozoides anuló los cambios de fosforilación en
tirosina asociados con la capacitación. Estos resultados sugieren que los
prostasomas interfieren con los procesos de fosforilación/desfosforilación de
residuos tirosina que acompañan a la capacitación.