Participación de CRISP1 del cúmulus en el proceso de fertilización

ERNESTO JI; MORENO I; CALB DE; WEIGEL MUÑOZ M; BATTISTONE A; COHEN D; GIOJALAS L; CUASNICÚ PS

Buenos Aires

Jornada; XIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología (SAB); 2012

Sociedad Argentina de Biología (SAB)

Recientes resultados de nuestro laboratorio indican que la proteína CRISP1 está presente en el cumulus oophorus que rodea al ovocito y que su ausencia en ratones knockout (KO) para CRISP1 produce una disminución significativa en el  porcentaje de fertilización. El objetivo del presente trabajo ha sido investigar el mecanismo por el cual CRISP1 del cúmulus participa en la fertilización. Ensayos en los cuales se evaluó la capacidad de los espermatozoides de penetrar complejos cúmulus-ovocito (COCs) de animales KO y salvajes (WT) para CRISP1, revelaron que los COCs KO eran penetrados por un número significativamente menor de espermatozoides que los COCs control. Estudios en los cuales se evaluó la dispersión de  células del cúmulus tanto espontánea como inducida por hialuronidasa no revelaron diferencias entre COCs KO y WT, sugiriendo que la ausencia de CRISP1 en el COC no afectaría la estructura de la matriz extracelular. En base a ello,  se evaluó la posibilidad de que CRISP1 actuara como un quimioatractante de espermatozoides. Estudios de videomicroscopia utilizando diferentes concentraciones (1 pM a 10 uM) de CRISP1 nativa o recombinante (expresada en bacterias) como así también CRISP1 desnaturalizada por calor o bien desnaturalizada y reducida por DTT, revelaron que la misma tendría una actividad quimiotractante dependiente de la conformación. En conjunto, estos resultados confirman la participación de CRISP1 del cúmulus en el proceso de fertilización a través de un mecanismo de quimiotaxis de los espermatozoides hacia el ovocito.