Notch y progesterona regulan la función del cuerpo lúteo de ratas superovuladas

ACCIALINI P; HERNANDEZ F; BAS D; ABRAMOVICH D; TESONE M

Buenos Aires

Congreso; XIV Jornada científica anual de la Sociedad Argentina de Biología (SAB); 2012

SAB

El sistema Notch regula la proliferación, diferenciación y apoptosis celular. Incluye una familia de receptores transmembrana (Notch1-4) que interactúan con ligandos Delta-like y Jagged. Los receptores transmembrana son clivados luego de su unión al ligando por dos proteasas, siendo la gama secretasa la que libera el dominio intracelular (NICD) que se transloca al interior de la célula regulando su función. En trabajos previos hemos demostrado que los receptores Notch1, 4 y el ligando Dll4 se expresan en el cuerpo lúteo (CL) de ratas preñadas y que la administración de prostaglandina F2alfa disminuye los niveles de los ARNm y la expresión proteica de los mismos. Además, el bloqueo intraovárico del sistema Notch disminuyó los niveles de Progesterona (P4) sérica  y aumentó la expresión de proteínas pro apoptóticas en el CL. La hipótesis del presente trabajo es que la P4 cumple un rol clave en la regulación de la vía de Notch y en la función luteal del CL de ratas superovuladas. En este estudio se aislaron CL de ovario de ratas superovuladas con gonadotrofinas y se cultivaron en presencia de P4 (500ng/ml), aminoglutetimida (AG, inhibidor del citocromo P450scc 0.15 mM), DAPT (inhibidor de la gamma secretasa 20µM) y los inhibidores con el agregado de P4 durante 4 horas. La función luteal fue estudiada midiendo P4 en el medio de cultivo por RIA. El contenido de PCNA, y la fosforilación de ERK y AKT fueron medidos en extractos de CL por Western blots. El tratamiento de los CL con cada inhibidor disminuyó los niveles de P4 (P <0.05, n = 4) en el medio de cultivo. Los niveles de PCNA aumentaron significativamente con el agregado de P4 y el DAPT revirtió este efecto. La fosforilación de AKT disminuyó con el agregado de AG y/o DAPT (P <0.05, n = 4), aunque la fosforilación de ERK disminuyó solo en presencia de AG. Estos resultados sugieren la existencia de un mecanismo regulatorio entre P4 y la vía de señalización de Notch en CL de ratas superovuladas.