La señalización mediada por NOTCH, PI3K/AKT y MAPK y su posible interacción en una línea ovárica tumoral de granulosa humana

PAZOS MAIDANA C; ACCIALINI P; IRUSTA G; TESONE M

Mar del plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de Investigaciones Clínicas (SAIC); 2012

SAIC

En diversos sistemas tumorales se ha demostrado que el sistema Notch se encuentra involucrado en la supervivencia de células tumorales de diversos orígenes, y además que interacciona con diferentes vías de transducción de señales. Anteriormente hemos observado que la inhibición de este sistema afecta la proliferación, esteroidogénesis y parámetros apoptóticos de una línea ovárica tumoral de granulosa humana (KGN). En el presente trabajo, nuestro objetivo es estudiar el rol de las vías de señalización intracelulares PI3K/AKT, MAPK y el sistema NOTCH sobre la viabilidad y migración de la línea celular KGN. Asimismo, investigamos la posible interacción entre estas vías. Para ello, realizamos ensayos de viabilidad y migración celular en células KGN en presencia de distintas concentraciones de los inhibidores LY294002, UO126 y DAPT. Además, realizamos western blot de AKT, ERK1/2 y sus estados fosforilados, y de la proteína PTEN en presencia de DAPT. Observamos una inhibición de la viabilidad celular de manera concentración-dependiente al incubar células KGN en presencia de los inhibidores de las tres vías mencionadas comparado al control, LY294002 (p<0,01), UO126 (p<0,001) y DAPT (p<0,01). La migración celular también disminuyó significativamente en presencia de cada uno de los inhibidores mencionados, LY294002 (p<0,01); UO126 (p<0,05) y DAPT (p<0,05). Al inhibir el sistema Notch, observamos una disminución significativa en la fosforilación de la proteína AKT (control vs DAPT, p<0,05) y un aumento de la proteína PTEN (control vs DAPT, p<0,05). Sin embargo, no observamos cambios en la fosforilación de la proteína ERK. Con estos resultados sugerimos que las vías analizadas afectan la viabilidad y migración de las células KGN, y que el sistema Notch interacciona con la vía de transducción PI3K/AKT en este tipo celular.