La regulación cruzada de los receptores a histamina H1 y H2 involucra la heterodimerización de los mismos. Implicancias fisiológicas en un sistema de expresión endógena.

NATALIA ALONSO ; NATALIA FERNANDEZ; CINTIA NOTCOVICH; FEDERICO MONCZOR; ALBERTO BALDI; SILVIO GUTKIND; CARLOS DAVIO; CARINA SHAYO

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

(594) LA REGULACIÓN CRUZADA DE LOS RECEPTORES A HISTAMINA H1 Y H2 INVOLUCRA LA HETERODIMERIZACIÓN DE LOS MISMOS. IMPLICANCIAS FISIOLÓGICAS EN UN SISTEMA DE EXPRESIÓN ENDÓGENA Alonso, M.1, Fernández, N.2, Notcovich, C.1, Monczor, F.2, Baldi, A.1, Gutkind, S.3, Davio, C.2, Shayo, C.1 IBYME1 Cátedra de Química Medicinal. FFyB.UBA2 Oral and Pharyngeal Cancer Branch. National Institutes of Health.3 Los receptores H1 y H2 a histamina (RH1 y RH2) son receptores acoplados a proteína G y se coexpresan en varios tejidos, regulando la producción de IPs y de AMPc respectivamente. Previamente hemos descripto que en células CHO cotransfectadas, el tratamiento con agonistas H1 o H2 conduce a la desensibilización cruzada y cointernalización de ambos receptores. El objetivo del presente trabajo es profundizar el estudio de los mecanismos de respuesta cruzada entre ambos receptores y determinar su relevancia fisiológica en células U937 que expresan endógenamente ambos receptores. Mediante microscopia confocal en células HEK293T cotransfectadas con el RH1-CFP y el RH2-YFP observamos que el estímulo con agonistas H1 o H2 provoca la colocalización de los receptores en vesículas endosomales y la heterodimerización de los mismos (señal de FRET). Por otro lado, en células U937, el estímulo con cualquiera de los dos agonistas (H1 o H2) provocó una disminución en la capacidad de respuesta de ambos receptores y la cointernalización de los mismos (ensayos de unión) indicando la existencia de mecanismos de regulación cruzada entre RH1 y RH2 en este sistema. Al evaluar la implicancia de la misma, observamos una inhibición de la proliferación de un 40% luego de 48 h de tratamiento con el agonista H1 así como el arresto en SubG0/G1, que fueron revertidos significativamente por el agonista H2 (p<0,05, n=3). A su vez, detectamos la inducción de apoptosis por el agonista H1, evidenciada por ensayos de AnexinaV-FITC/ioduro de propidio y aumento en los niveles de PARP clivado (western blot), revertidos en presencia del agonista H2 (p<0,05, n=3). Este trabajo aporta nuevas evidencias sobre el mecanismo de regulación cruzada de los RH1 y RH2 y su papel fisiopatológico. Los nuevos conocimientos presentados contribuyen a la compresión de la compleja red de señalización de la histamina contribuyendo a la utilización más racional de sus ligandos.