ESTUDIO FUNCIONAL DE LA MODULACIÓN DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN NF-KAPPAB POR PROTEÍNAS FKBPS

DE LEO, ; MAZAIRA,; MOLINARI, A.; GALIGNIANA, M.; ERLEJMAN,

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; Congreso de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas; 2012

Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas

El factor de transcripción NF-κB (Rel A/p50) regula genes involucrados en la inflamación, diferenciación, muerte celular y promoción de tumores. Su activación es mediada por la fosforilaci- ón del inhibidor lκB y posterior degradación, lo que libera a NF-kB para translocar al núcleo. Previamente observamos que las FK506 binding proteins (FKBPs) modulan la actividad transcripcional NF-κB. Las FKBPs se caracterizan por presentar un dominio con actividad enzimática de peptidil-prolil-cis/trans-isomerasa (PPIasa) y un dominio TPR (series de 34 aminoácidos) de interacción con otras proteínas. Resultados previos del laboratorio demostraron que la proteína FKBP51 es capaz de inhibir la activación de NF-κB inducida por PMA (éster de forbol), mientras que FKBP52 estimula su activación, en forma PPIasa dependiente. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto funcional de esta modulación. Para ésto se realizaron ensayos de gen reportero para NF-κB en células HEK 293T estimuladas con PMA, y se observó que el efecto de FKBP52 fue revertido por cotransfección con FKBP51. Se logró transfectar en forma estable células HEK 293 (no T) con el plásmido de expresión pC-Neo-hFKBP51, por selección con el antibiótico G418. Al repetir el ensayo de sobreexpresión de FKBP52 en las células Hek 293 51+, no se observó estimulación en la actividad de NF-κB inducida por PMA. Además en estas mismas células se evalúo la proliferación celular en comparación con sus pares wild type (wt), encontrándose que la sobreexpresión de FKBP51 aumenta significativamente la proliferación celular. Finalmente encontramos que tanto en las células Hek 293 51+ como en las wt, Rel A co-inmunoprecipitó con FKBP51. Concluimos que FKBP51 y FKBP52 modulan la actividad transcripcional de NF-κB actuando en forma contrapuesta. Especulamos que el efecto observado sobre la proliferación celular podría explicar una de las funciones biológicas de las FKBPs en células tumorales donde FKBP51 se encuentran sobreexpresada.