IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Síntesis de 20-Cetopregnanos análogos de salpichrólidos. Determinación de su actividad antiestrogénica
Autor/es:
SONEGO JM; GARGIULO L; RIVERO E; LÜTHY IA; BURTON G; VELEIRO A
Lugar:
Cancún
Reunión:
Congreso; CONGRESO LATINOAMERICANO DE QUÍMICA - CLAQ 2012; 2012
Institución organizadora:
CLAQ 2012
Resumen:
Introducción Los salpichrólidos son un grupo de lactonas esteroidales de 28 carbonos, aislados de plantas de Salpichroa origanifolia (Lam) Thell. Forman parte de un grupo de compuestos naturales conocidos como withanólidos, los cuales están presentes en plantas pertenecientes a la familia de las Solanáceas.1,2 La actividad biológica de los withanólidos es muy diversa, por ejemplo presentan actividad antitumoral, antimicrobiana, antiinflamatoria, inmunomoduladora, fitotóxica, fungicida e insecticida. El primer salpichrólido aislado en 1992, se llamó salpichrólido A (1) (Figura 1). Este compuesto presenta dos características poco usuales dentro del grupo de los withanólidos: un anillo D aromático y un epóxido 5,6 con configuración alfa. Figura 1 En trabajos previos realizados en nuestro grupo se estudió la actividad como antialimentarios de los salpichrólidos 1-3 sobre las especies Musca domestica (mosca doméstica)3 y Tribolium castaneum (gorgojo de la harina de trigo),4 observándose el máximo efecto en el retardo del desarrollo para el compuesto 1. En base a estos resultados se estudió la actividad insecticida sobre la especie Ceratitis capitata (mosca de la fruta)5 de los compuestos 1-4 y análogos sintéticos de los mismos obtenidos por modificaciones químicas en los anillos A y B a partir del salpichrólido A (1). El salpichródio B (4) resultó ser el compuesto más activo con un EC50 (inhibición completa del desarrollo del 50% de las larvas) de 83 ppm. Recientemente Padrón y colaboradores informaron la actividad antiproliferativa de 22 withanólidos, entre los cuales se incluyen los salpichrólidos A (1), G (2) y C (3) en un panel de líneas celulares tumorales derivadas de epitelio mamario humano.6 Tres de estas líneas, T47D, MCF7 y MCF7/BUS, expresan al receptor de estrógenos (ER+), mientras que las líneas MDA-MB-23 y SK-Br-3 no poseen un receptor de estrógenos funcional (ER-). Sólo en el caso de los salpichrólidos A (1) y C (3), se observó actividad antiproliferativa de manera dependiente del tipo celular. El salpichrólido A (1) mostró actividad específica en las líneas celulares ER+, mientras que el salpichrólido C (3) sólo resultó activo en las líneas MCF7 y MCF7/BUS. El hecho que los salpichrólidos 1 y 3 hayan provocado respuesta antiproliferativa solamente en células ER+, sugiere la inhibición de mecanismos de transducción de señales dependientes del ER involucrados en la inducción de proliferación celular. Resultados y discusión Como se mencionó anteriormente, la presencia de un anillo D aromático es una característica inusual dentro del grupo de los withanólidos y las distintas actividades biológicas informadas para los salpichrólidos parecen depender en parte de la presencia de este anillo. El objetivo de este trabajo es la obtención de análogos de salpichrólidos con cadena lateral simplificada, con este fin se desarrolló una metodología para la obtención de 20-cetopregnanos con anillo D aromático. Por otra parte la obtención de análogos sencillos que presenten el anillo D aromático y las funcionalidades presentes en los anillos A o B de los salpichrólidos, permite realizar un estudio de las relaciones estructura-actividad al comparar la actividad de los mismos con la de los salpichrólidos naturales. Con este objetivo se sintetizaron los 20-cetopregnanos 5-12 (Figura 2) y se determinó la actividad antiproliferativa de los mismos, la cual se comparó con la actividad de salpichrólidos naturales aislados de plantas de Salpichroa origanifolia. Figura 2 El compuesto 5 se obtuvo a partir de las ciclopropilcetona 13, la cual se preparó a partir de acetato de pregnenolona siguiendo una metodología similar a la usada previamente en nuestro grupo de trabajo (Esquema 1).7 Esquema 1: Reactivos: a) BF3.Et2O, 1,2-dicloroetano, 50°C; b) Br2, 1,2-dicloroetano, 0°C, oscuridad; c) DBU, CH3CN, reflujo. El compuesto 6 se obtuvo por hidrólisis del 3-acetato en 5 por tratamiento con KOH 5% (aq), THF-MeOH. Utilizando una metodología similar a la empleada para obtener los compuestos 5 y 6, se obtuvieron los compuestos 7 y 8. Los compuestos 9 y 10 se obtuvieron por epoxidación selectiva del 3-hidroxi-Delta5 esteroide 8 usando ácido 3-cloroperbenzoico como agente oxidante, obteniéndose una relación 4:1 del 5alfa,6alfa-epoxiesteroide 9 y su isómero 5beta,6beta- epoxi.8 La introducción de una función oxigenada en C-1 se llevó a cabo a partir del compuesto 5 mediante una estrategia que incluye la introducción de un doble enlace delta1, la formación de un epóxido en posición 1,2 y posterior apertura del mismo por tratamiento con hidrazina (Esquema 2). Esquema 2 Reactivos a ) (i) NaBH4, MeOH, CH2Cl2; (ii) TBDMSiCl, imidazol, DMF, 50°C; (iii) KOH 5% en H2O, MeOH-THF; (iv) PCC, BaCO3, CH2Cl2, MS(3Å); b) (i) Bu4NF, THF, T amb, (ii) Ac2O, Py, T amb, (iii) IBX (2eq), DMSO, 90°C; c) H2O2 30%, KOH en MeOH, CH2Cl2; d) (i) NH2NH2, EtOH, H2O, 85 ºC, (ii) KOH, MeOH, CH2Cl2, T amb, (iii) MnO2, Na2CO3, CH2Cl2, T amb; e) PCC, CH2Cl2, BaCO3, MS(3Å). La actividad antiestrogénica se ensayó en células de cáncer de mama humanas, MCF-7 (que expresan receptores alfa y beta de estrógenos). En particular el salpichrólido A (1) y el compuesto 12 revirtieron significativamente la estimulación con estrógenos, comportándose como promisorios antiestrógenos. Bibliografía 1. Veleiro, A. S.; Oberti, J. C.; Burton, G.; In Studies in Natural Products Chemistry, (Part L) Bioactive Natural Products; Atta-ur-Rahman ed.; Elsevier Sciences Publishers; Amsterdam Vol. 32, 1019-1052 (2005). 2. Misico, R. I.; Oberti, J. C.; Nicotra, V.; Barboza, G.; Gil, R., Burton, G.; Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, 127-229 Springer-Verlag Ed. (2011). 3. Mareggiani, G; Picollo, M. I.; Zerba, E.; Burton, G.; Tettamanzi, M. C.; Benedetti-Doctorovich, M. O. V.; Veleiro, A. S.; J. Nat. Prod., 63, 1113 (2000). 4. Mareggiani, G; Picollo, M. I.; Veleiro, A. S.; Tettamanzi, M. C.; Benedetti-Doctorovich, M. O. V.; Burton, G.; Zerba, E.; J. Agric. Food Chem., 50, 104 (2002). 5. Bado S.; Maregianni, G.; Amiano, N.; Burton, G.; Veleiro, A. S.; J. Agric. Food Chem., 52, 2875 (2004). 6. Machin, R. P; Veleiro, A. S.; Nicotra, V. E.; Oberti, J. C.; Padrón, J. M.; J. Nat. Prod., 73, 966 (2010). 7. Ferrara, A.; Burton, G.; Tetrahedron Letters, 37, 929 (1996). 8. Ma, E.; Kim, H.; Kim, E.; Steroids, 70, 245 (2005).