ROR1 contribuye al desarrollo y progression de melanoma.

FERNANDEZ N; LORENZO D; BRAVO MS; LOPEZ BERGAMI, P

Buenos Aires

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

ROR1 PARTICIPA EN EL DESARROLLO Y PROGRESIÓN DE MELANOMA.Fernández N.B., Lorenzo D.M., Bravo M.S., López-Bergami P.Los receptores ROR1 y ROR2 pertenecen a una familia conservada de receptores tirosina quinasa yactualmente son reconocidos como receptores de la vía de señalización de Wnt. Se ha demostradoque ROR2 participa en la vía no canónica de Wnt y está implicado en la migración y polaridadcelular mediada por Wnt5a. ROR1 en cambio, fue estudiado con menor profundidad. Se observó susobreexpresión en leucemia linfocítica crónica confiriendo una mayor supervivencia a estas células.Coincidentemente, ROR1 fue identificada como una quinasa de supervivencia en células HeLa. En estetrabajo determinamos que ROR1 se encuentra activo y sobreexpresado en melanoma, lo que nos llevóa determinar su rol en la proliferación, apoptosis, y demás procesos relacionados con el crecimientotumoral. Generamos dos líneas celulares (A375 y Lu1205) que expresan en forma estable un shorthairpin ARN contra ROR1 o control (shARN ROR1 o scramble). La expresión de este shRNA provocóuna disminución en los niveles de ARNm y proteína de ROR1. El silenciamiento de ROR1 disminuyóel crecimiento celular un 30% en ambas líneas celulares. Determinamos cambios en la apoptosispor Anexina V e Ioduro de Propidio. El silenciamiento de ROR1 incrementó la apoptosis inducidapor privación de suero en las células A375 y Lu1205. El silenciamiento de ROR1 también redujo elcrecimiento independiente de anclaje en agar blando. Las células A375 shARN ROR1 dieron origena un menor número de colonias y de menor tamaño que las generadas por las células control. Estosresultados indican que ROR1 contribuye al crecimiento celular en melanoma. Luego, realizamos ensayosde adhesión cuantificados por tinción con cristal violeta. Las células shARN ROR1 se adhirieron conmayor eficiencia que las scramble indicando que ROR1 está implicado en la adhesión celular. Estosresultados sugieren que la vía de señalización Wnt-ROR1 juega un importante rol en la progresión demelanoma, afectando el crecimiento, la apoptosis y la adhesión celular.