PARTICIPACIÓN DE LA FAMILIA DE TIROSINA KINASA SRC (SFK) EN LA CAPACITACIÓN DEL ESPERMATOZOIDE DE RATA

BATTISTONE MA; WEIGEL MUÑOZ M; ERNESTO JI; MALDERA JA; KRAPF D; VISCONTI P; CUASNICU P S

Mar del Plata

Congreso; 56 Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011

Estudios recientes de nuestro laboratorio sugieren la participación de la familia SFK en la fosforilación en tirosina del espermatozoide de rata, apoyando la existencia de dos vías paralelas conducentes a la capacitación, una dependiente de la activación de PKA, y otra mediada por la inactivación de las ser/thr fosfatasas. Con el fin de investigar el rol de dichas vías en la cascada de señales que conduce a la capacitación del espermatozoide de rata, en el presente trabajo se evaluó el efecto de inhibidores de SFK sobre diversos parámetros de la capacitación. Ensayos de Western blot indicaron que la presencia de inhibidores de SFK (SKI606 y SU6656) durante la capacitación produjo una inhibición en los niveles de fosforilación tanto en tirosina como en los sustratos de PKA. Considerando que SFK inhibe a ser/thr fosfatasas, los espermatozoides fueron expuestos a un inhibidor de dichas fosfatasas (ácido okadaico, AO), observándose reversión del bloqueo descripto al inactivar a SFK. La inhibición de SFK produjo también una disminución significativa (p<0,001) en los porcentajes de motilidad de los espermatozoides capacitados (control 69,3 ± 4,3, SU6656 42,9 ± 2,6 y SKI606 34,8 ± 3,8) mientras que la presencia de AO también revirtió esta inhibición (AO 78,2 ± 4,2, SU6656+AO 65,5 ± 2,1 y SKI606 +AO 58,1 ± 6,9). Finalmente, se estudió la capacidad fertilizante de espermatozoides expuestos a SKI606 y SU6656 durante la capacitación; observándose una reducción significativa (p<0.001) en el porcentaje de fertilización in vitro de ovocitos sin zona pellucida (control 92,6 ± 3,7, SU6656 17,3 ± 4,3 y SKI606 11,3 ± 5,7). Esta disminución no se observó en espermatozoides capacitados en presencia de inhibidores de SFK conjuntamente con OA (AO 60,4 ± 13,9, SU6656+AO 55,7 ± 3,9 y SKI606+AO 45,8 ± 10, 0). En conjunto, estos resultados confirman la participación de SFK en la capacitación del espermatozoide de rata y su rol indirecto a través de la inactivación de ser/thr fosfatasas.