LA FOSFORILACIÓN DE STAT3 EN SER 727 INDUCIDA POR PROGESTÁGENOS ES NECESARIA PARA SU ACTIVACIÓN TRANSCRIPCIONAL Y PARA PROMOVER EL CRECIMIENTO DE CÉLULAS DE CÁNCER DE MAMA

TKACH, M; RIVAS MA; DIAZ FLAQUE, MC; PROIETTI CJ; CHARREAU EH; ELIZALDE, PV; SCHILLACI, R

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos que el acetato de medroxiprogesterona (MPA) induce la fosforilaciónde Stat3 en Tyr705 y su activación transcripcional en células de cáncer de mama humano, T47D,y en células murinas progestágeno-dependientes, C4HD. Además, comprobamos que el MPA,vía p42/44 MAPK, induce la fosforilación de Stat3 en el residuo Ser 727 (S727). En este trabajoevaluamos si la fosforilación de Stat3 en S727 es requerida para una completa activacióntranscripcional de Stat3 inducida por progestágenos y su participación en la proliferación celular.Para ello, co-transfectamos células C4HD con el plásmido 4xm67-luciferasa, que contiene sitiosde unión a Stat3, y con un vector de expresión de Stat3 wild-type (wt) o de Stat3 mutada en S727(Stat3S/A). La presencia de la proteína mutante bloqueó la capacidad del MPA de aumentar laactividad luciferasa (p<0,05). Al explorar la activación del promotor de ciclina D1 (cicD1)inducido por MPA observamos que las células C4HD y T47D transfectadas con Stat3S/A nomostraron un aumento de la actividad transcripcional de cicD1 a diferencia de las transfectadascon Stat3 wt (p<0,05). Mediante ensayos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP)demostramos que la transfección con Stat3S/A impide el reclutamiento de Stat3 a su sitio deunión en el promotor del gen de la cicD1 inducido por MPA. La transfección con Stat3S/Aresultó en una inhibición de la proliferación celular inducida por MPA, medida por incorporaciónde timidina-3H (p<0,001). Finalmente exploramos el requerimiento de pStat3 S727 para elcrecimiento in vivo dependiente de MPA de células C4HD y observamos una inhibición delcrecimiento tumoral en el grupo de ratones inyectados con células transfectadas con Stat3S/A(p<0,01).Demostramos por primera vez que la fosforilación de Stat3 en S727 es necesaria para lacompleta activación transcripcional de Stat3 y para la proliferación celular de células de cáncerde mama inducida por MPA tanto in vitro como in vivo .