TGF-beta1 en presencia de progesterona estimula la proliferación de las células de Leydig

GONZALEZ CR; CALANDRA RS; GONZALEZ CALVAR SI

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual (SAIC); 2011

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

El factor de crecimiento transformante beta1 (TGF-b1) participa en la homeostasis celular. En trabajos previos describimos que la administración ?in vivo? de esta citoquina junto con progesterona (P4) a ratones de 3 semanas de edad conduce a un aumento en el volumen de las células de Leydig (Gonzalez y col., J.Rep. Dev.2010). El objetivo del presente trabajo fue estudiar los mecanismos de señalización involucrados en la acción de TGF-b1 en presencia o ausencia de P4 y analizar si TGF-b1 puede ejercer un efecto proliferativo sobre las células de Leydig. Se utilizó la línea celular comercial no tumoral proveniente de ratones inmaduros TM3. Las células fueron cultivadas en Medio DME-Ham F12 (1:1) suplementado con 5% de suero de caballo y 2,5% de suero fetal de ternero. Luego de ser sincronizadas, las células fueron incubadas con TGF-b1 (1ng/ml) durante 5,10,15, 30 y 60 min y se analizó la expresión génica de p15 por Real-time-PCR, factor que bloquea el ciclo celular por inhibición de CDK4/6. La expresión de p15 fue máxima a los 30 min de incubación. La incubación en presencia de U0126 (inhibidor de erk 1 /2; 10 uM) SB 203580(inhibidor de p38; 40 uM) y SP 600125 (inhibidor de JNK; 20 uM) con TF-b1 indicó que tanto erk 1 / 2 como p38 están involucradas en este efecto (p<0,05). En presencia de P4, TGF-beta 1 indujo la expresión de erg-1 y de PCNA a los 5 min de incubación. Mediante el ensayo de proliferación con MTT se pudo establecer que TGF-b1 en presencia de P4 (1 uM) conduce a un efecto proliferativo (incremento de 150% en TGF-b1 + P4 respecto de basal, TGF-b1 o P4 individualmente, p<0,05). En este efecto el receptor tipo I: ALK-5 no estaría involucrado dado que en presencia de su inhibidor especifico SB431542 (1,3 10-6 M) se mantiene el efecto proliferativo de TGF-b1 y P4 (p<0,005). Conclusión: TGF-b1 puede ser el responsable de la hiperplasia observada en algunas patologías dado que en presencia de P4 puede conducir a una proliferación de las células de Leydig.