Progesterona regula vía Notch la funcionalidad del cuerpo lúteo en un modelo in vitro

HERNANDEZ F; BAS D; IRUSTA GRISELDA; TESONE M

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica SAIC; 2011

Sociedad Argentina de Investigación clínica

La vía de señalización de Notch incluye una familia de receptores transmembrana (Notch1-4) que interactúan con ligandos específicos (familia Delta-like, Jagged1 y Jagged2). Al unirse el ligando con el receptor, el complejo gamma secretasa libera el dominio intracelular (NICD) que se transloca al núcleo donde regula la transcripción de genes involucrados en la proliferación, diferenciación y apoptosis celular. En trabajos previos hemos demostrado que los receptores Notch1, 4 y el ligando Dll4 se expresan en el cuerpo lúteo (CL) de ratas preñadas y que la administración de prostaglandina F2α disminuye los niveles de los ARNm y la expresión proteica de los mismos. Además, el bloqueo intraovárico del sistema Notch disminuyó los niveles de Progesterona (P4) sérica  y aumentó la expresión de proteínas pro apoptóticas en el CL. La hipótesis del presente trabajo es que P4 cumple un rol clave en la regulación de la vía de Notch en el CL de ratas preñadas. Se aislaron CL de ovario de ratas en el día 16 de gestación y se cultivaron en presencia de aminoglutetimida (inhibidor del citocromo P450scc 0.15 mM), DAPT (inhibidor de la gamma secretasa 20µM), ambos inhibidores juntos y de los inhibidores con el agregado de P4 (500ng/ml) durante 4 horas. Se evaluó la funcionalidad luteal midiendo los niveles de P4 en el medio por RIA, y por Western la expresión de miembros de la familia Notch. El tratamiento de los CL con cada inhibidor disminuyó significativamente los niveles de P4 (P<0.05, n= 5) en el medio de cultivo y este efecto se potenció en presencia de ambos. Además estos inhibidores disminuyeron los niveles proteicos del fragmento intracelular de Notch1 (NICD) comparado al grupo control (P<0.05, n=5). Sin embargo no se observaron diferencias significativas del NICD de Notch4. Estos resultados sugieren la existencia de un mecanismo regulatorio entre Progesterona y la vía de señalización de Notch involucrado en la funcionalidad del CL de la preñez.