IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
EVIDENCIAS DE SINERGISMO EN LA DESCONDENSACIÓN DE LA CROMATINA DE ESPERMATOZOIDES MURINOS: EFECTO DEL DERMATÁN SULFATO Y LA HEPARINA.
Autor/es:
SANCHEZ, MC; FONTANA, V; ROMANATO M; JULIANELLI V; CALVO L; CALVO JC
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociediad Argentina de Investigacíon Clínica SAIC; 2011
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
EVIDENCIAS DE SINERGISMO EN LA DESCONDENSACIÓN DE LA CROMATINA DE ESPERMATOZOIDES MURINOS: EFECTO DEL DERMATÁN SULFATO Y LA HEPARINA. Introducción La descondensación cromatínica es fundamental para formar el pronúcleo masculino y permitir singamia. Requiere tiorreducción de disulfuros en protaminas e intercambio con histonas ovocitarias que, en espermatozoides humanos dependería de heparán sulfato. En espermatozoides murinos encontramos que dermatán sulfato (DS) también descondensa la cromatina. Las diferencias observadas entre ambas especies podrían indicar una condensación diferencial de la cromatina. Objetivos Estudiar la descondensación en espermatozoides murinos, utilizando DS, comparando con heparina y evaluar diferencias en el grado de condensación. Metodología Los animales se sacrificarán y, en forma aséptica se obtendrán los espermatozoides epididimarios, que serán descondensados con Heparina/DS y GSH durante distintos tiempos a 37 °C. Se fijarán con glutaraldehído 2% en PBS y se determinará el porcentaje descondensación en contraste de fases, clasificando según refringencia, aspecto granuloso y tamaño del núcleo: sin cambios (S), moderadamente descondensados (M), o groseramente descondensados (G). El porcentaje de descondensación será la suma (M+G), por duplicado y evaluando al menos 200 células en cada muestra. Resultados y conclusiones DS induce una descondensación similar al de heparina, con cinética para ambos glicosaminoglicanos semejante (t0.5 = 43.55 + 2.19 min para Heparina y 35.45 + 2.17 min para DS). Sin embargo, combinando ambos, se observa efecto sinérgico con disminución del t0.5 a 17.96 + 1.2 min, correspondiendo a un incremento en descondensación de 3 veces por sobre la suma de los efectos individuales, indicando una interacción diferente de cada GAG con la cromatina, posiblemente debido a las características químicas de las moléculas, como también un probable grado de compactación diferente de la cromatina. Esta compactación diferencial podría incidir en fertilización asistida, cuando observamos fallas en la descondensación.