Efecto del origen genético sobre el fenotipo de los animales knock out para CRISP1

WEIGEL MUÑOZ M; BATTISTONE MA; VASEN G; ERNESTO J; DA ROS VG; MALDERA JA; COHEN DJ; CUASNICU PS

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Una de las moléculas propuestas como mediadoras del proceso de fertilización es la proteína epididimaria CRISP1, descripta por nuestro grupo y primer miembro de la familia CRISP (Cystein Rich Secretory Proteins). Con el fin de estudiar la relevancia de CRISP1 para la fertilidad, nuestro laboratorio generó ratones knock out (KO) para esta proteína, los cuales, resultaron fértiles, presentaron espermatozoides con menores niveles de AMPc, fosforilación en tirosina y fertilización. Considerando que una mutación puede producir diferentes fenotipos dependiendo del origen genético de los animales, el objetivo del presente proyecto consistió en estudiar el fenotipo en animales KO para CRISP1 que exhiban un alto grado de homogeneidad génica. Para tal fin, los animales KO con un origen genético híbrido 129SvEv/C57BL/6 fueron sometidos a 7 ciclos de retrocruza con animales C57BL/6 a lo largo de dos años, hasta la obtención de animales KO con una base genética prácticamente homogénea (99.2%) para la cepa C57BL/6. El análisis de estos animales reveló un fenotipo diferente al de la colonia híbrida original a juzgar por el hecho de que el tiempo de parición fue significativamente mayor para hembras apareadas con machos KO que heterocigotas (HT)  Asimismo, los espermatozoides provenientes de animales KO presentaron niveles de motilidad y reacción acrosomal inducida por progesterona (15 uM), significativamente menores a los de los animales HT. La bajada en motilidad fue revertida por el agregado de dibutiril AMPc e IBMX (3-isobutil-1-metil-xantina) durante la capacitación, sugiriendo que dicha bajada sería debida a los menores niveles de AMPc de los espermatozoides KO. En conjunto, estos resultados revelan la importancia de CRISP1 para la motilidad y reacción acrosomal de los espermatozoides, e indican que el KO para CRISP1 constituiría un nuevo ejemplo de la influencia del origen genético sobre el fenotipo de los animales.