PARTICIPACIÓN DE CRISP1 DEL TRACTO REPRODUCTOR FEMENINO EN EL PROCESO DE FERTILIZACIÓN.

ERNESTO JI; BATTISTONE, MA ; CALB D; WEIGEL MUÑOZ M; COHEN DJ; CUASNICÚ PS

Panamá

Congreso; XXII REUNIÓN BIENAL DE ALIRH; 2011

Recientes resultados de nuestro laboratorio indican que la proteína epididmaria CRISP1 se encuentra presente en el tracto reproductor femenino de la rata. Teniendo en cuenta la descripta participación de CRISP1 del espermatozoide en el proceso de fertilización,  en el presente trabajo se investigó  la  participación de CRISP1 del tracto reproductor femenino en el proceso de fertilización en ratón. Ensayos de rt-PCR revelaron la presencia de mRNA para CRISP1 en útero, ovario, oviducto y células del cumulus. El estudio de la expresión de dichos mensajeros mediante Western blot (Wb), utilizando un anticuerpo contra CRISP1, indicó la presencia de la proteína en los tres tejidos mencionados. Por su parte, el empleo de la técnica de inmunofluorescencia indirecta sobre cumulus reveló la presencia de CRISP1 en las células foliculares. En base a ello, se evaluó la posible participación de CRISP1 del cumulus en el proceso de fertilización mediante ensayos in vitro utilizando complejos cumulus-ovocito (COC) de animales knock out (KO) para CRISP1 generados en nuestro laboratorio. Los resultados mostraron una disminución  significativa en el porcentaje de ovocitos fertilizados provenientes de animales KO respecto al control. Asimismo, los COC KO y control fueron inseminados con espermatozoides previamente marcados con Hoescht, evaluándose el número de espermatozoides que penetraron el cumulus en cada caso. Los resultados indicaron una disminución significativa en dicho número para los COC de animales KO. En conjunto, estos resultados confirman la existencia de CRISP1 en el tracto reproductor femenino y la participación de CRISP1 del cumulus en el proceso de fertilización.