• Proteínas G pequeñas: una vía de señalización adicional para el receptor H1 a histamina

NOTCOVICH CINTIA, RIOBO NATALIA A, KAZANIETZ MARCELO G, DAVIO CARLOS A, SHAYO CARINA C

Mar del Plata

Congreso; LI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2006

SAIC

La histamina es una amina endógena involucrada en diversos procesos fisiológicos y patológicos. Hasta el momento se describieron 4 subtipos de receptores: rH1, 2, 3 y 4 de la familia de los GPCRs. El rH1 traduce la señal vía Gq. Varios GPCRs acoplados a esta vía activan cascadas asociadas a la familia de las G pequeñas, Rho, modulando procesos como secreción, migración, control del ciclo celular y apoptosis. Dado que la histamina modula varias de estas respuestas a través del rH1, nos planteamos como objetivo, estudiar la asociación entre la activación del rH1 y la activación de proteínas G pequeñas de la familia de Rho. Para ello, transfectamos células CHO en forma estable con el rH1. Ensayos de unión demuestran que los clones expresan el rH1 y que son funcionales (modulación de IPs). Ensayos de pulldown con proteínas específicas que unen Rac y RhoA activas, indican que la histamina y 2-(3-F3CH3fenil)histamina (agonista H1) inducen la activación de ambas en forma tiempo y concentración dependientes. Dicha activación es bloqueada por 10 mM pirilamina (antagonista H1). Muchos de los GPCRs acoplados a Gq están asociados a la activación de proteínas G12/13. Con el objetivo de determinar la proteína G (q o 12/13) involucrada en la activación de RhoA por el rH1, evaluamos la activación de Rho en células transfectadas en forma transitoria con vectores de expresión para inhibidores de la señalización de Gq y G12/13 (RGS2 y dominio RGS de p115-RhoGEF, respectivamente). Los resultados indican que la activación de RhoA es mediada por Gq. Dado que la activación de RhoA modula SRE (Serum Response Element), realizamos ensayos de gen reportero (SRE-LUC) en presencia de los inhibidores antes mencionados y observamos que la activación del SRE se encuentra fundamentalmente mediada por Gq y por G12/13 en menor medida. Estos resultados indican por primera vez que la histamina a través del rH1 modula la vía de las proteínas G pequeñas de la familia Rho.