Caracterizacion de la expresion de cadherina epitelial en las gametas y su participacion en fecundacion. Identificacion de alteraciones en espermatozoides de pacientes en tratamiento por infertilidad

VEIGA F; MARIN BRIGGILER, CI; VALCARCEL, A; GONZALEZ ECHEVERR¨ªA MF; VAZQUEZ-LEVIN MH

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; XIV Congreso Argentino de Medicina Reproductiva; 2011

Sociedad Argentina de Medicina Reproductiva

EL PRESENTE TRABAJO HA OBTENIDO EL PRIMER PREMIO "DR PEDRO R. FIGUEROA CASAS" DEL CONGRESO ARGENTINO DE MEDICINA REPRODUCTIVA (2011) CARACTERIZACION DE LA EXPRESION de cadherina epitelial en las gametas y su participacion en fecundacion. IDENTIFICACION DE alteraciones en espermatozoides de pacientes en tratamiento POR INFERTILIDAD Veiga1, Maria Florencia; Marin-Briggiler1, Clara Isabel; Valcarcel2, Alberto; Gonzalez-Echeverria3, Fernanda; Vazquez-Levin1, Monica Hebe. 1 Instituto de Biologia y Medicina Experimental (IBYME-CONICET); 2 IFER, Instituto de Fertilidad, 3 Centro Medico Fertilab, Buenos Aires, Argentina Objetivo: La fecundacion involucra eventos de adhesion celular ovocito-espermatozoide, pero las bases moleculares no se conocen totalmente. La proteina Cadherina epitelial (cadE) esta presente en la membrana celular, se asocia al citoesqueleto de actina a traves de proteinas como b-catenina y participa en la adhesion celular. Sin embargo, su presencia en las gametas y su participacion en la fecundacion no ha sido evaluada. En este estudio se caracterizo la expresion de cadE en tejidos reproductivos, ovocitos y espermatozoides y se evaluo su participacion en la fecundacion. Se emplearon 2 modelos: murino y humano. Ademas se estudio la expresion de cadE en espermatozoides de pacientes en tratamiento por infertilidad. Materiales y Metodos: Se emplearon tecnicas para deteccion del ARN mensajero (ARNm) de cadE (retrotranscripcion y PCR), de la proteina (Western immunoblotting, inmunocitoquimica e inmunohistoquimica) y ensayos de interaccion de las gametas (murino: fecundacion in vitro (FIV), interaccion espermatozoide-zona pellucida y espermatozoide-oolema; humano: ensayo de hemizona; ensayo de penetracion de ovocitos de hamster). Resultados: Los estudios describen 1) la expresion del ARNm de cadE en testiculo y epididimo 2) la presencia de la forma completa de cadE (120 KDa) en extractos epididimarios y localizacion en la membrana de las celulas epiteliales 3) la presencia de cadE en estructuras membranosas del plasma seminal humano y del fluido epididimario murino 4) la deteccion de las formas proteicas de cadE (120 KDa), B-catenina (92 KDa) y actina (43 KDa) en las gametas 5) la localizacion en espermatozoides murinos epididimarios y humanos del eyaculado no capacitados y capacitados (>70% en capuchon acrosomal) y reaccionados (humano: >70% toda la cabeza; murino: 100% region post-acrosomal) 6) la presencia de cadE en ovocitos (zona pellucida y oolema) 7) la capacidad de anticuerpos anti cadE de inhibir la FIV en el modelo murino y la interaccion espermatozoide-ZP y espermatozoide-oolema en ambas especies (p< 0,05) 8) la identificacion de alteraciones en el porcentaje de espermatozoides inmunorreactivos para cadE en pacientes en tratamiento por infertilidad. Conclusiones: Este es el primer estudio que describe de manera exhaustiva la deteccion de cadherina epitelial en gametas murinas y humanas, presenta evidencias de su rol en la fecundacion y describe la identificacion de pacientes con alteraciones de esta proteina en los espermatozoides.