EL RECEPTOR DE ESTRÓGENOS ALFA COMO MEDIADOR DEL EFECTO PROLIFERATIVO DE PROGESTÁGENOS EN CÁNCER DE MAMA

GIULIANELLI, SEBASTI¨¢N; VAQUE, JP; WARGON, VICTORIA; SOLDATI, ROC¨ªO; VANZULLI, SILVIA; MARTINS, RUB¨¦N; ZEITLIN, E.; HELGUERO, LUISA; LAMB, CAROLINE A.; MOLINOLO, ALFREDO; GUTKIND, JS; LANARI, CLAUDIA

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigaci¨®n Cl¨ªnica; 2011

En carcinomas mamarios murinos C4-HD y en c¨¦lulas humanas T47D hemos observado que el acetato de medroxiprogesterona (MPA) induce la activaci¨®n del receptor de estr¨®genos alfa (RE¦Á) y su asociaci¨®n nuclear con el receptor de progesterona (RP). El bloqueo del RE¦Á inhibe la proliferaci¨®n celular mediada por el progest¨¢geno. Postulamos que dicha interacci¨®n a nivel gen¨®mico ser¨ªa fundamental para desarrollar respuestas proliferativas mediadas por MPA. Nuestro objetivo fue estudiar in vivo la acci¨®n del antiestr¨®geno puro ICI 182.780 (ICI) sobre el crecimiento de tumores C4-HD estimulados con MPA, los mecanismos moleculares involucrados en la interacci¨®n de ambos receptores en c¨¦lulas humanas y evaluar dicha interacci¨®n en 15 muestras de c¨¢ncer de mama humano. ICI (5mg/semana) indujo la regresi¨®n completa de tumores C4-HD creciendo con MPA. A las 48 hs de tratamiento, observamos una disminuci¨®n en marcadores de proliferaci¨®n: ¨ªndice mit¨®tico, Ki67, Ciclina D1 (CCND1) y MYC (p<0.001). Adem¨¢s, se observ¨® un aumento de apoptosis (p<0.001) asociado a una disminuci¨®n en BCL/XL y aumento en BAX y AIF. Se estudi¨® la interacci¨®n entre RE¦Á y RP en promotores de dos genes regulados por MPA, CCND1 y MYC, en c¨¦lulas T47D. MPA (10nM) indujo la expresi¨®n temprana de CCND1 y MYC (PCR cuantitativa; p<0.001). El bloqueo del RE¦Á por ICI o siRNA, inhibi¨® la transcripci¨®n de ambos genes por MPA (p<0.001). En ensayos de inmunoprecipitaci¨®n de la cromatina (ChIP) se corrobor¨® la uni¨®n de RP y RE¦Á a los mismos sitios en los promotores de CCND1 y MYC inducido por MPA. El tratamiento con ICI no afect¨® la uni¨®n de RP a ambas secuencias regulatorias pero s¨ª inhibi¨® la uni¨®n del RE¦Á. Confirmamos la colocalizaci¨®n nuclear entre RE¦Á y RP por microscop¨ªa confocal en 4 muestras de c¨¢ncer de mama humano. Los resultados demuestran que la presencia del RE¦Á, interactuando con el RP, en promotores de CCND1 y MYC es fundamental para la transcripci¨®n g¨¦nica y la proliferaci¨®n celular inducida por MPA.