Regulación entre células dendríticas tolerogénicas y células NK

ZWIRNER, NORBERTO WALTER

Tucumán

Congreso; 59a Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Sociedad Argentina de Inmunología

Desde hace ya más de una década, se han caracterizado los mecanismos que regulan el diálogo recíproco entre células dendríticas (CD) y células citotóxicas naturales (natural killer o NK). Las CD inmaduras (CDi) son inducidas a madurar por las células NK en un fenómeno que depende de los receptores de superficie NKp30 y DNAM-1, y mediadores solubles tales como el IFN-g, mientras que las CDi refractarias a la maduración son un blanco de la actividad citotóxica de las células NK. Por otra parte, las CD maduras (CDm) adquieren resistencia a la citotoxicidad mediada por células NK y estimulan su la activación a través de los receptores mencionados y mediante la secreción de IL-12, IL-15 e IL-18, lo que promueve una mayor secreción de IFN-g por parte de las células NK. Sin embargo, se desconocen las consecuencias de la interacción entre células NK y CD tolerogénicas (CDt). Las CDt son capaces de inducir fenómenos de tolerancia y anergia de la respuesta adaptativa y tienen importancia fisiopatológica en diferentes circunstancias tales como en entornos tumorales, sitios en los que son reclutadas con el objeto de suprimir o silenciar la respuesta inmune anti-tumoral. Además, la transferencia adoptiva de CDt o la inducción de CDt mediante la modulación farmacológica aparecen como estrategias aplicables en pacientes con enfermedades autoinmunes. Por ello, los objetivos de este estudio fueron investigar las consecuencias y mecanismos involucrados en la interacción entre CDt y células NK. Para ello, generamos CDt humanas mediante la diferenciación de monocitos a CDi con GM-CSF e IL-4, y maduración con LPS en presencia de dexametasona. Las CDt mostraron un patrón de expresión de marcadores de superficie similar a las CDm en cuanto a moléculas de clase II del CMH, CD1a, CD83 y CD86, secretaron cantidades similares de IL-10, pero las CDt fueron incapaces de secretar IL-12. Seguidamente, realizamos co-cultivos de CDt con células NK de sangre periférica de donantes sanos y observamos que las CDt, a diferencia de las CDm, fueron incapaces de promover la secreción de IFN-g por células NK. El fenómeno se debió a mediadores solubles (fue mimetizado empleando medios condicionados de CDt) e involucró receptores de superficie de células NK (ya que CDt lavadas exhaustivamente también fueron incapaces de promover la secreción de IFN-g por células NK). Este silenciamiento de la actividad de las células NK no involucró su apoptosis. Con el objeto de elucidar los mecanismos involucrados, realizamos experimentos de bloqueo con anticuerpos monoclonales contra receptores de superficie de células NK. Llamativamente, el bloqueo de NKp46, un receptor activador involucrado en el reconocimiento de células tumorales y de células infectadas con virus, restauró la capacidad de las CDt de promover la secreción de IFN-g por parte de las células NK. Además, el bloqueo simultáneo de NKp30 y NKp46 permitió observar una secreción de IFN-g parcial, lo que indica que en este sistema experimental, NKp30 y NKp46 estarían ejerciendo efectos antagónicos. El bloqueo de IL-10 también permitió restaurar la secreción de IFN-g por parte de las células NK, y experimentos adicionales mostraron que las células NK son capaces de suprimir la producción de IL-10 por parte de las CD en un fenómeno que depende de NKp46, lo que confirma que este receptor juega un rol importante durante la interacción entre CDt y células NK. Nuestros resultados indican que las CDt poseen la capacidad de silenciar la activación de las células NK en un proceso que es dependiente de IL-10 y de NKp46, un receptor del cual hasta el momento no se conocían funciones inhibitorias. Este mecanismo de inmunosupresión podría tener relevancia en entornos tumorales y podría ser importante como mecanismo tolerogénico en diferentes situaciones fisiopatológicas.