Interacción entre tejido adiposo mamario humano normal o tumoral y células epiteliales mamarias normales o tumorales: regulación del crecimiento y de la progresión tumoral

PISTONE CREYDT V; FLETCHER S; SACCA PA; BRUZZONE A; LUTHY I; GONZÁLEZ EG; CALVO JC

Jornada; XXVI JORNADAS NACIONALES DE ONCOLOGIA DEL INSTITUTO “ÁNGEL H. ROFFO”; 2010

El estroma juega un rol preponderante en el desarrollo y diferenciación del tejido mamario. El tejido adiposo es el tipo de tejido estromal predominante en la mama. El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto de medios condicionados (MC) de explantos de tejido adiposo humano normal (EANh) y tumoral (EATh) sobre la regulación de la proliferación, adhesión, migración y actividad de MMPs en líneas celulares epiteliales mamarias humanas normales (MCF-10A) y tumorales (MCF-7 y T47D). Obtuvimos fragmentos de tejido adiposo normal y tumoral mamario de pacientes intervenidos quirúrgicamente (consentimiento informado). Recolectamos los MCs de los EANh (n=3) y EATh (n=1 de tumor de mama lobulillar y n=4 de tumores de mama ductales) luego de 24hs de incubación y los utilizamos para los diferentes ensayos. Crecimos células epiteliales MCF-10A, MCF-7 y T47D, las incubamos con los MCs y cuantificamos la proliferación por MTS; la migración por cicatrización de la herida; y la actividad de MMPs por zimografía. Finalmente evaluamos cambios en la adhesión de MCF-7 y T47D sobre placas expuestas previamente a los diferentes MCs de los explantos. La proliferación de MCF-10A, MCF-7 y T47D aumentó significativamente con respecto al control (p<0,05) luego de incubar 24 hs con los MCs de EATh, mientras que ninguna de las tres líneas celulares epiteliales presentaron cambios significativos luego de incubarlas con los MCs de EANh. El MC de EATh proveniente del tumor de mama lobulillar fue el único que aumentó la migración de MCF-7 y T47D ya que cerró significativamente la herida luego de 6hs de incubación (p<0,05). Los MCs de EATh presentaron actividad de MMP-2 y MMP-9, siendo esta actividad significativamente mayor en el MC de EATh proveniente del tumor lobulillar (p<0,05). Así mismo, la incubación de las células epiteliales con los diferentes MCs de EATh estimuló la actividad de ambas MMPs en MCF-10A, MCF-7 y T47D. Por último, la adhesión de MCF-7 y T47D fue significativamente mayor con los MCs de EANh respecto a los MCs de EATh (p<0,05). En conclusión, observamos que los MCs provenientes de los explantos tumorales fueron capaces de aumentar la proliferación y estimular la actividad de MMP-2 y MMP-9 de las células epiteliales normales y tumorales. El MC de EATh proveniente del tumor lobulillar parece tener un mayor efecto sobre la capacidad metastásica de las células epiteliales tanto por el aumento de la migración como por la mayor actividad de MMPs observado. Por último, los MCs de EATh parecen tener una expresión significativamente menor de proteínas de adhesión que los MCs de EANh. Podemos concluir que el microambiente tumoral coevoluciona e interacciona en forma  recíproca con el epitelio alterado, por tanto, se podría revertir el comportamiento/fenotipo tumoral mediante la regulación o modificación de su microentorno.