Cascada de señalización de la hormona liberadora de corticotrofina (CRH) en células de Leydig del hámster Dorado

ROSSI, SP; CALANDRA RS; FRUNGIERI MB

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LV Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, SAIC; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente, hemos descripto que la hormona liberadora de corticotrofina (CRH), a través de receptores CRHR1, inhibe la producción de testosterona en el testículo del hámster Dorado. El objetivo del presente trabajo ha sido investigar la/s vía/s de señalización intracelular/es asociadas a la acción de CRH en células de Leydig del hámster. Para ello, a partir de hámsteres Dorados adultos machos mantenidos en fotoperíodo normal (14hs de luz/día), se disecaron los testículos y purificaron las células de Leydig en un gradiente discontínuo de Percoll. Dichas células fueron tratadas con CRH determinándose, luego de 3hs de incubación, la expresión de c-jun y c-fos (PCR cuantitativa), y los niveles de fosforilación de P42/44, P38, JNK46/54 y c-jun (Western blot). CRH (1μM) no alteró la fosforilación de P38, pero inhibió (P<0.05) la expresión de c-fos, c-jun y la fosforilación de MAPKs (densitometría, valor arbitrario asignado al control=1, c-fos=0.64+0.04, c-jun= 0.26±0.02, fosfo-c-jun=0.62+0.05, fosfo-P44=0.60±0.05, fosfo-P42=0.42±0.04, fosfo-JNK54=0.63±0.04 y fosfo-JNK46=0.30±0.02). Por otra parte, el agregado de CRH a células de Leydig incubadas en presencia de un inhibidor de fosfatasas de tirosinas, el ortovanadato sódico (van), redujo (P<0.05) la fosforilación de MAPKs (ver tabla) y la producción de testosterona (pmol/millón de células de Leydig, van=14.64±0.44 vs van+CRH=11.52±0.36). Wb, densitometría (valores arbitrarios) fosfo-P42 fosfo-P44 fosfo-JNK54 fosfo-JNK46 van 1 1 1 1 van + CRH 0.11+0.01 0.07+0.005 0.31+0.04 0.01+0.002 En conclusión, este trabajo describe un efecto estimulatorio ejercido por CRH sobre la actividad de fosfatasas de tirosinas, y la consiguiente disminución en la fosforilación de P42/44 y JNK46/54, que participaría en la inhibición de la síntesis de testosterona desencadenada por CRH en células de Leydig del hámster.