Caracterización de un transcripto novel de cadherina epitelial humana y evidencias de su relación con cambios asociados a la progresión tumoral

LAPYCKYJ, L.; MATOS, ML; GIUSTINA, S; PODHAJCER, O; REVENTOS, J; VAZQUEZ LEVIN, MH

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LV Reunión Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

Se adjunta resumen Ha obtenido Premio Cherny Accessit 2010 Caracterización de un transcripto novel de cadherina epitelial humana y evidencias de su relación con cambios asociados a la progresión tumoral. Lara Lapyckyj 1§, M. Laura Matos 1§, Silvina Giustina 1, Osvaldo Podhajcer 2, Jaume Reventos 3 y Mónica Vazquez-Levin 1 1 Instituto de Biología y Medicina Experimental, CONICET-UBA, Buenos Aires, Argentina, 2 Instituto Leloir, Buenos Aires, Argentina, 3 Unidad de Investigación de Hospital de Vall d`Hebron, Barcelona, España.Cadherina epitelial (cadE) es miembro fundador de las cadherinas y media la adhesión celular. CadE es un supresor tumoral; su disminución/ausencia se asocia a cambios (Transición-Epitelio-Mesenquimal, EMT) que facilitan invasión/metástasis. Nuestro grupo identificó un ARNm novel de cadE humana generado por “splicing” alternativo (SA). Se lo llamó cadEvar para distinguirlo del salvaje (cadEWT). Se caracterizó cadEvar y evaluó su asociación con la progresión tumoral: 1)El ARNm cadEvar presentó una deleción que da un cambio del marco de lectura y una señal de stop prematura; CadEvar sería un producto secretorio 2)Por qPCR se encontraron valores bajos de expresión de cadEvar/cadEWT en células tumorales/no tumorales, excepto ciertos casos 3) cadEvar estaría bajo control de NMD, con acumulación del ARNm en células incubadas con actinomicina-D 4)La transfección transiente de cadEvar dio una forma secretoria de 94KDa 5)Las transfectantes estables MCF7-cadEvar presentaron niveles de cadEvar hasta 40 veces superiores y de cadEWT hasta 10000 veces menores. En el medio condicionado se vio la forma de 94 KDa. Los niveles de ARNm de b-catenina aumentaron y la proteína localizó en el citoplasma. La actina se organizó en fibras de estrés. Las células presentaron fenotipo fibroblástico y bajo contacto celular. Los marcadores de EMT Twist y Snail y cadN aumentaron. El ARNm de Dys aumentó >2000 veces y se detectó la proteína. La adhesividad celular (gota invertida) disminuyó; la motilidad (herida) y capacidad migratoria (transwell) aumentaron (p<0,01) 6)Las células MCF7-cadEvar produjeron tumores en ratones nude; el crecimiento tumoral aumentó (p<0,02) en el 1er pasaje y hubo mayor índice de mitosis (p<0,001) 11)La relación cadEvar/cadEWT aumentó en muestras de cáncer ovárico. La caracterización de cadEvar y la evaluación de su efecto sobre cadEWT y proteínas relacionadas podrá contribuir a comprender la regulación molecular de la adhesión celular en condiciones normales/patológicas.