Mecanismos moleculares involucrados en la inhibición de la fosforilación en tirosina durante la capacitación de espermatozoides knockout para CRISP1

MALDERA JA; BATTISTONE MA; PAGOTTO R; PIGNATARO OP; COHEN DJ; CUASNICÚ PS

Congreso; XII Jornadas Multidisciplinarias de la Sociedad Argentina de Biología; 2010

67. MECANISMOS MOLECULARES INVOLUCRADOS EN LA INHIBICIÓN DE LA FOSFORILACIÓN EN TIROSINA DURANTE LA CAPACITACIÓN DE ESPERMATOZOIDES KNOCKOUT PARA CRISP1 Maldera JA, Battistone MA, Pagotto R, Pignataro OP, Cohen DJ, Cuasnicu PS. IBYME-CONICET, Argentina. e-mail: battistone@dna.uba.ar La proteína CRISP1 se asocia al espermatozoide durante la maduración epididimaria y participa en la fertilización. Considerando que los espermatozoides provenientes de ratones Crisp1-/- generados en nuestro laboratorio presentan menores niveles de fosforilación en tirosina durante la capacitación, en el presente trabajo se investigaron los mecanismos involucrados en dicha inhibición. El agregado de CRISP1 durante la capacitación de espermatozoides Crisp1-/- no revirtió el nivel de fosforilación. Dado que la fosforilación en tirosina está mediada por un aumento en los niveles de AMPc, se estudió si el efecto de la falta de CRISP1 podía ser revertido por el agregado de un análogo del AMPc junto a un inhibidor de la fosfodiesterasa. Los resultados revelaron que la presencia de estos compuestos estimuló a niveles control la fosforilación de los espermatozoides mutantes, sugiriendo un defecto en la acumulación de AMPc en los mismos. Estudios posteriores de RIA confirmaron los menores niveles de AMPc en los espermatozoides Crisp1-/-. Teniendo en cuenta que durante el transito por el epidídimo los espermatozoides adquieren tanto a CRISP1 como la capacidad para sufrir el proceso de capacitación, estos estudios sugieren que los menores niveles de fosforilación en los espermatozoides Crisp1-/- podrían deberse a la falta de asociación de CRISP1 durante la maduración.Crisp1-/- generados en nuestro laboratorio presentan menores niveles de fosforilación en tirosina durante la capacitación, en el presente trabajo se investigaron los mecanismos involucrados en dicha inhibición. El agregado de CRISP1 durante la capacitación de espermatozoides Crisp1-/- no revirtió el nivel de fosforilación. Dado que la fosforilación en tirosina está mediada por un aumento en los niveles de AMPc, se estudió si el efecto de la falta de CRISP1 podía ser revertido por el agregado de un análogo del AMPc junto a un inhibidor de la fosfodiesterasa. Los resultados revelaron que la presencia de estos compuestos estimuló a niveles control la fosforilación de los espermatozoides mutantes, sugiriendo un defecto en la acumulación de AMPc en los mismos. Estudios posteriores de RIA confirmaron los menores niveles de AMPc en los espermatozoides Crisp1-/-. Teniendo en cuenta que durante el transito por el epidídimo los espermatozoides adquieren tanto a CRISP1 como la capacidad para sufrir el proceso de capacitación, estos estudios sugieren que los menores niveles de fosforilación en los espermatozoides Crisp1-/- podrían deberse a la falta de asociación de CRISP1 durante la maduración.Crisp1-/- no revirtió el nivel de fosforilación. Dado que la fosforilación en tirosina está mediada por un aumento en los niveles de AMPc, se estudió si el efecto de la falta de CRISP1 podía ser revertido por el agregado de un análogo del AMPc junto a un inhibidor de la fosfodiesterasa. Los resultados revelaron que la presencia de estos compuestos estimuló a niveles control la fosforilación de los espermatozoides mutantes, sugiriendo un defecto en la acumulación de AMPc en los mismos. Estudios posteriores de RIA confirmaron los menores niveles de AMPc en los espermatozoides Crisp1-/-. Teniendo en cuenta que durante el transito por el epidídimo los espermatozoides adquieren tanto a CRISP1 como la capacidad para sufrir el proceso de capacitación, estos estudios sugieren que los menores niveles de fosforilación en los espermatozoides Crisp1-/- podrían deberse a la falta de asociación de CRISP1 durante la maduración.Crisp1-/-. Teniendo en cuenta que durante el transito por el epidídimo los espermatozoides adquieren tanto a CRISP1 como la capacidad para sufrir el proceso de capacitación, estos estudios sugieren que los menores niveles de fosforilación en los espermatozoides Crisp1-/- podrían deberse a la falta de asociación de CRISP1 durante la maduración.Crisp1-/- podrían deberse a la falta de asociación de CRISP1 durante la maduración.