El agregado de una forma soluble novel de cadherina epitelial a cultivos de células MCF-7 altera la morfología celular y la expresión de la molécula de adhesión y otras proteínas relacionadas a la progresión tumoral

ROSSO M.; MATOS M.; LAPYCKYJ L.; VAZQUEZ-LEVIN M. H.

MEDICINA (BUENOS AIRES)

MEDICINA (BUENOS AIRES)

Lugar: Buenos Aires; Año: 2011 vol. 71 p. 167 - 168

0025-7680

Introducción: Cadherina epitelial (cadE) es una proteína transmembrana involucrada en la adhesión celular. Alteraciones en su expresión, localización y/o funciones se asocian a la progresión tumoral, con expresión de marcadores de invasión, entre ellos disadherina. Nuestro grupo identificó un transcripto novel de cadE humana generado por “splicing” alternativo (cadEvar) que codifica para un producto secretorio. La transfección estable de células tumorales MCF-7 con cadEvar condujo a alteraciones en la morfología celular y al aumento de sus características invasivas, a una disminución del transcripto salvaje de cadE (cadEwt) y a la expresión de marcadores moleculares de invasión. Objetivo: Evaluar el efecto del agregado de medio condicionado (MC) conteniendo cadEvar sobre la expresión de cadEwt y proteínas relacionadas en cultivos de células MCF-7. Metodología: 1) Se eligieron células HEK293 que no expresan cadE, se transfectaron con el plásmido pcDNA3-cadEvar (HEK-var) y control sin inserto (HEK-pc) y se determinaron los niveles de ARNm y formas proteicas de cadE en extractos celulares y MC de las transfectantes. 2) Se suplementaron cultivos celulares de MCF-7 con MC de HEK-var, HEK-pc y medio no condicionado control durante 7 días. Se monitoreó periódicamente la morfología celular y se cuantificaron los ARNm de cadEwt y disadherina una vez transcurrido el cultivo. Resultados: Se confirmó la expresión de cadEvar en células HEK-var (ARNm y proteína en los MC). Las células MCF7 incubadas con el medio HEK-var presentaron 1) cambios en la morfología celular, que tomó características de tipo fibroblástica, 2) una disminución (85%) de los niveles del ARNm de cadEwt y 3) un aumento (100%) de los niveles del ARNm de disadherina. Conclusión: El agregado de MC de células que expresan cadEvar se asoció a la pérdida de morfología celular epitelial, a una disminución del transcripto cadEwt y a un aumento de disadherina, eventos que se relacionan con la progresión tumoral.