Participación del sistema endocannabinoide y el nitrérgico en la liberación de los espermatozoides del epitelio oviductal en bovinos

CLAUDIA E. OSYCKA-SALUT, MARÍA GRACIA GERVASI Y SILVINA PEREZ-MARTINEZ

Mar del PLata, Buenos Aires

Congreso; LIV Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LVII Reunión Ciéntifica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2009

Participación del sistema endocannabinoide y el nitrérgico en la liberación de los espermatozoides del epitelio oviductal en bovinos Claudia E. Osycka-Salut, María Gracia Gervasi y Silvina Perez-Martinez Lab. Biología de la Reproducción en Mamíferos-CEFyBO/CONICET Previamente demostramos en bovinos que la anandamida (AEA), principal endocannabinoide, y su análogo estable MetAEA, favorecen la capacitación espermática promoviendo la liberación de los espermatozoides (ESP) unidos a células epiteliales del oviducto (CEO). Además varios estudios revelan la participación del óxido nítrico (NO) en la capacitación del ESP. Es sabido que los receptores de cannabinoides pueden activar vías de señales que regulan los niveles de NO intracelular. Por lo tanto, se propuso estudiar la posible interacción entre el sistema endocannabinoide y el nitrérgico en la capacitación espermática y en la interacción ESP-oviducto. Para ello, se realizaron experimentos de capacitación in vitro de ESP bovinos criopreservados. La evaluación de la capacitación se realizó mediante las técnicas de clorotetraciclina y de inducción de la reacción acrosomal por lisofosfatidilcolina analizada con la lectina PSA unida a FITC. En ambos casos, la incubación de los ESP con MetAEA (1.4 nM) ó AEA (1 nM) incrementó el porcentaje de ESP con patrón capacitado (15%; p<0,01). La presencia de L-NAME (inhibidor de NO sintasas) ó de Hemoglobina (Hb: 30 µg/ml; secuestrador de NO) en el medio de incubación inhibió el efecto capacitante de los endocannabinoides (p<0,01). A su vez, se realizaron co-cultivos de ESP con CEO. Luego de 1 h de incubación se agregó al medio los distintos agentes para evaluar la liberación de los ESP. Los resultados indicaron que la incubación con NOC18 (1 µM; dador de NO) ó L-Arginina (10 mM; sustrato de las NOS) induce la liberación de los ESP de las CEO al igual que la AEA ó MetAEA (NOC18: 40%; L-Arginina 30%; AEA: 35%; MetAEA: 43%; p<0,05). La presencia de L-NAME ó Hb revirtió el efecto de ambos endocannabinoides (p<0,01). En conjunto, los resultados obtenidos sugieren que la AEA podría inducir la capacitación espermática y/o promover la liberación de los ESP de las CEO a través de la activación de la vía que involucra al NO en bovinos. Reproducción Palabras Claves: Espermatozoide-oviducto, endocannabinoides, óxido nítrico, bovinos