Participación de NF-kB y p38 MAPK en la inhibición de la respuesta inflamatoria cardíaca por 15-Deoxy-delta;12,14 PGJ2.

HOVSEPIAN E, PENAS F, GOREN N.B

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2009

SAIC-SAI

La endotoxemia o shock séptico producido por lipopolisacárido (LPS) genera hipotensión y disfunción multiorgánica provocando importantes daños cardiacos. Se ha propuesto que la respuesta inflamatoria sería modulada por 15dPGJ2 (15d) a través de vías alternativas además de PPARγ. Por lo cual nos hemos propuesto analizar la participación de NF-κB y p38 MAPK, junto a PPARγ, en los efectos ejercidos por 15d en miocardiocitos neonatales estimulados con LPS. Para ello, se cultivaron células cardíacas de ratones CF-1 neonatos y se estimularon con LPS 10μg/ml o pre-incubaron con 15d 2μM. En trabajos anteriores hemos demostrado que 15d inhibe la expresión de óxido nítrico sintasa 2 (NOS-2) y metaloproteasa 9 (MMP-9) en nuestro modelo. También, inhibió la liberación de oxido nítrico (NO) en un 82±2% (p<0,01) que fue revertida  por el antagonista de PPARγ, GW9662 10μM. Además, mediante zimografía observamos que 15d disminuye la actividad de MMP-9 (Control (C): 0,2±0,02; LPS: 1,1±0,03; LPS+15d: 0,3±0,02; D.O./mm2, p<0,01). A fin de estudiar vías alternativas a PPARγ, NF-κB y p38 MAPK fueron analizadas mediante Western blot y observamos que 15d inhibe la translocación nuclear de la subunidad p65 de NF-κB en un 80±2% (p<0,01) respecto a LPS. Igualmente, extractos citosólicos de células pre-incubadas con 15d presentaron un retardo de 66±2% (p<0,01) en la fosforilación de p38 MAPK comparado con LPS. Además, valoramos el efecto de inhibidores de NF-κB: MG132 (MG) 20μM y de p38 MAPK: SB203580 (SB) 10μM sobre la liberación de NO. El tratamiento con SB y 15d previo al estímulo de LPS, inhibió aun mas la liberación de NO (C: 10±0,9; LPS: 58±4,7; LPS+SB: 40±3,5; LPS+SB+15d: 22±1,8; NO μM, p<0,01). Como era de esperar, el tratamiento con MG y 15d previo a LPS mantuvo los niveles de NO tan bajos como con MG solo (LPS+MG: 13±0,8; LPS+MG+15d: 15±1,0; NO μM, p<0,01). Estos resultados sugieren que 15d regula la respuesta inflamatoria a través de PPARγ y de las vías de NF-κB y p38 MAPK.