CEFYBO   02669
CENTRO DE ESTUDIOS FARMACOLOGICOS Y BOTANICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis del mecanismo de inducción de HO-1 por ACTH en células adrenales
Autor/es:
ASTORT F; MERCAU M; MARTINEZ CALEJMAN C; REPETTO EM; PECCI A; CYMERYNG CB
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
Si bien el  ACTH es el principal estímulo esteroidogénico de la zona fasciculata adrenal, trabajos previos de nuestro laboratorio han demostrado la participación de la actividad hemo oxigenasa-1 (HO-1) en la modulación de sus efectos a nivel adrenal y su inducción por el estímulo hormonal. El objetivo de este trabajo fue analizar el mecanismo molecular de inducción de HO-1 por ACTH en una línea celular derivada de corteza adrenal murina (Y1). En una primera serie de experimentos las células fueron transfectadas con los plásmidos p(-4)HO-1, p(-2.5)HO-1, p(-1.2)HO-1 y p(-0.4)HO-1 (fragmentos -4043,+74, -2500;+74, -1200;+74 y -400;+74 del promotor de HO-1 de ratón clonados río arriba del gen de luciferasa en el vector pGL2) y posteriormente tratadas con ACTH (12.5 mU/ml, 24 horas). El tratamiento hormonal produjo un aumento del 50 % en la actividad de todos los plásmidos ensayados (p<0.01) y un incremento en la generación de especies reactivas del oxigeno (medidas con el reactivo diacetado de fluoersceina p<0.01). La co-incubación con el antioxidante bilirrubina (1 mM) previno la inducción de HO-1 por ACTH. Se evaluó la participación de NFΚB en este mecanismo, utilizando el vector reportero Κb/LUC sin encontrarse diferencias luego del tratamiento con ACTH. La inducción de HO-1 por ACTH no fue modificada por la presencia de un inhibidor de NADPH oxidasa mientras que todos los inhibidores de MAPKs utilizados (p38, JNK y ERK1/2) la bloquearon parcialmente. En las células Y1, ACTH activaría factores de transcripción que se unen a sitios del promotor de HO-1 ubicados en una región acotada entre -400 y +74. El mecanismo utilizado podría involucrar factores de transcripción activables por AMPc, por estrés oxidativo y por MAPKs (como CREB o AP-1 por ej.) con sitios de unión ubicados en la región del promotor indicada. Los resultados presentados permiten descartar la participación de la vía de NFΚB y la actividad de NADPH oxidasa en el mecanismo descripto.