Expresión de efectores de señalización del gusto amargo en glándula submaxilar murina y células SCA-9

DASSO M,; DIEZ RA,; SALES ME

Mar del Plata, Buenos Aires Argentina

Congreso; LIV Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica-LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica-Sociedad Argentina de Inmunología

En mamíferos, la percepción del gusto amargo es mediada por receptores T2R (T2Rs) expresados en células gustativas, ubicadas en la superficie dorsal de la lengua, paladar y faringe. La unión de ligandos amargos activa la proteína G gustducina, resultando en la estimulación de fosfodiesterasas, guanilato ciclasas y fosfolipasa Cb2 (PLCb2). Recientemente se  observó la expresión de T2Rs en tracto gastrointestinal y glándulas exócrinas. Los compuestos amargos teofilina (TEO), denatonio (DEN) y cicloheximida (estos dos últimos agonistas conocidos de T2Rs en células gustativas) inhiben la secreción de amilasa salival en glándula submaxilar murina (GSM) en forma concentración-dependiente, siendo 10־9M la concentración inhibitoria máxima. Demostramos farmacológicamente que este efecto se produce a través de la vía fosfolipasa C-óxido nítrico sintasa (NOS). Observamos por Western Blot (DO relativa a la expresión de la proteína gliceraldehído 3 fosfato deshidrogenasa) que T2R6 (DO=10,06±2,48, n=2), la subunidad alfa de la proteína G inhibitoria Gai (16,26±3,25, n=2) y PLCb2 (1,59±0,35, n=2) están expresados en GSM. Por inmunohistoquímica vimos en GSM tratadas con TEO y DEN una atenuación en la inmunomarcación de amilasa con respecto al control, predominantemente en los ductos interlobulares. También observamos la presencia de T2R6 (3,61±0,90, n=2), Gai (2,00±0,30, n=2) y  PLCb2 (2,37±0,52, n=2) en células SCA-9, derivadas de fibroblastos tumorales de GSM. Concluimos que la expresión de tales efectores en células SCA-9 permitiría estudiar in vitro la señalización de compuestos amargos, y que la inhibición de la secreción de amilasa en células ductales de GSM ocurriría por la vía T2R-Gai-PLCb2-NOS.