La melatonina protege a los fotorreceptores del daño oxidativo disminuyendo la produccion de especies oxigeno reactivas

MONACO, S; GERMAN, OLGA; ROSENSTEIN, RUTH; ROTSTEIN, NORA; POLITI, LUIS E.

Buenos Aires

Congreso; VI Congreso de la Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2009

LA MELATONINA PROTEGE A LOS FOTORRECEPTORES DEL DAÑO OXIDATIVO DISMINUYENDO LA PRODUCCION DE ESPECIES OXIGENO REACTIVAS Mónaco S.1, German OL.1, Rosenstein RE.2, Rotstein NP.1, Politi LE.1 1Inst. Invest. Bqcas., UNS-CONICET, B. Blanca, Bs. As. 2Lab. Neuroqca. Retiniana y Oftalmol. Experimental, Depto. Bioqca. Humana, Fac. Medicina, UBA, CONICET, Bs. As. smonaco@criba.edu.ar Objetivos: En muchas enfermedades neurodegenerativas de la retina los fotorreceptores (FR) degeneran progresivamente por apoptosis causando ceguera en forma irreversible. El daño oxidativo participa en la activación de la apoptosis, por lo que es de gran relevancia identificar moléculas y mecanismos que eviten dicho daño. Por su potente acción antioxidante, la melatonina (Mel) ha sido propuesta como posible factor de protección de la retina neural frente al daño oxidativo. Trabajos previos han demostrado que los FR de retina de rata en cultivos carentes de factores de supervivencia degeneran por apoptosis luego de 4 días, y que el tratamiento con agua oxigenada (H2O2) también induce dicha apoptosis. En este trabajo investigamos si la Mel es capaz de proteger a los FR de la apoptosis durante el desarrollo in vitro o inducida por el daño oxidativo reduciendo la producción de especies oxigeno reactivas (ROS). Métodos: cultivos neuronales puros de retina de rata suplementados con o sin Mel 40nM, se mantuvieron por un periodo de seis días in vitro o fueron tratados a día 3 con 10mM H2O2. A distintos tiempos se analizaron la viabilidad celular a través del ensayo de MTT y con ioduro de propidio; la apoptosis mediante el ensayo de TUNEL y la formación de ROS con la sonda DFCA. Resultados: Mel redujo la apoptosis de los FR y disminuyó la formación de ROS al día 6 in vitro, comparado con cultivos controles. El tratamiento con H2O2 disminuyó la viabilidad celular y aumentó la formación de ROS en los cultivos, mientras que el agregado de Mel  promovió la supervivencia de los FR y evitó el incremento en la producción de ROS. Conclusiones: estos resultados sugieren que la Mel protegería a los FR de la apoptosis ya sea inducida por H2O2 o a durante su desarrollo temprano in vitro, y que este efecto protector podría deberse a su acción antioxidante, ya que estaría disminuyendo la formación de ROS.