CEFYBO   02669
CENTRO DE ESTUDIOS FARMACOLOGICOS Y BOTANICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
NEURONAL PLASTICITY IN CA1 HIPPOCAMPAL NEURONS AFTER HYPOXIA-ISCHEMIA.
Autor/es:
SARACENO, E; CACERES, LG; GUELMAN, LR; KRUSE, MS; VALVERDE, G; MADUREIRA D; GIRALDEZ ALVAREZ, LD; COIRINI, H; CAPANI, F
Lugar:
Buzios, RJ, Brasil
Reunión:
Congreso; Ier Congreso IBRO/LARC De Neurociencias Da América Latina, Caribe E Península Ibérica; 2008
Institución organizadora:
IBRO/LARC
Resumen:
Curso temporal de las alteraciones conductuales, histológicas y de marcadores de estrés oxidativo inducidas en el hipocampo de ratas irradiadas al nacimiento. Cáceres, L. G.1; Aón, L.2; Zorrilla Zubilete, M.A.1; Saraceno, E.2; Capani, F.2; Guelman, L. R.1 - 1Facultad de Medicina, UBA-CEFyBO-CONICET - Neurofarmacología; 2Facultad de Medicina (UBA) - Departamento Bioquímica Humana Objetivos: El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de las radiaciones ionizantes sobre el hipocampo (Hip), desde el punto de vista conductual, histológico y bioquímico. Métodos: Ratas Wistar macho neonatas fueron irradiadas con radiación X en la región cefálica. Luego de 30 y 90 días, se testeó la conducta de evitación pasiva (EP) y de reconocimiento de objetos (RO), así como los niveles de especies reactivas de oxígeno (ROS), la actividad de las enzimas antioxidantes catalasa (CAT) y superóxido dismutasa (SOD) y de la proteína kinasa C (PKC). Finalmente, el Hip se evaluó histológicamente. Resultados: Los resultados mostraron un aumento en las ROS a los 30 días en los Hip de los animales irradiados (Rx) con respecto a los controles (C) (pmol DCF/mg/min, C: 0.21 ± 0.02, Rx: 0.31 ± 0.01, p< 0.05) y una disminución a los 90 días (pmol DCF/mg/min, C: 0.15 ± 0.02, Rx: 0.06 ± 0.01, p< 0.05). No se encontraron cambios en CAT, mientras que la SOD se encontró disminuida a los 30 días (U/mg, C: 0.38 ± 0.01; Rx: 0.33 ± 0.01, p< 0.05) y sin cambios a los 90. La actividad de PKC se encontró aumentada en los animales irradiados a los 30 días (pmol/mg, C= 39.2 ± 1.7; Rx= 96.9 ± 10.9, p< 0.05). La histología del Hip irradiado se encontró afectada, tanto a nivel morfológico como de la citoarquitectura, la cual empeoró a los 90 días. Finalmente, se observó una mejor performance en EP de animales de 30 días (T2/T1, C: 28.9 ± 6.7; Rx: 51.6 ± 8.2 p<0.05), sin cambios a los 90. El test de RO mostró en los animales Rx un empeoramiento en la memoria de reconocimiento sólo a los 90 días (N/T, C: 0.57 ± 0.05; Rx: 0.42 ± 0.03, p<0.05). Conclusiones: Si bien se observó un daño histológico en el Hip, los resultados sugieren que el aumento de ROS y la concomitante caída de SOD a los 30 días podrían estar induciendo el aumento de PKC, favoreciendo una mejor performance en el test de EP. Estos resultados, junto con el hallazgo de un daño histológíco en el Hip y un empeoramiento de la memoria de RO, y una caída de las ROS con recuperación de los niveles de SOD observados a los 90 días, sugieren la existencia de un mecanismo plástico compensatorio para contrarrestar el ataque de ROS. Keywords: Radiaciones ionizantes - hipocampo - SOD - ROS - evitación pasivaSupported by: UBACYT M083 Curso temporal de las alteraciones conductuales, histológicas y de marcadores de estrés oxidativo inducidas en el hipocampo de ratas irradiadas al nacimiento. Cáceres, L. G.1; Aón, L.2; Zorrilla Zubilete, M.A.1; Saraceno, E.2; Capani, F.2; Guelman, L. R.1 - 1Facultad de Medicina, UBA-CEFyBO-CONICET - Neurofarmacología; 2Facultad de Medicina (UBA) - Departamento Bioquímica Humana Objetivos: El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de las radiaciones ionizantes sobre el hipocampo (Hip), desde el punto de vista conductual, histológico y bioquímico. Métodos: Ratas Wistar macho neonatas fueron irradiadas con radiación X en la región cefálica. Luego de 30 y 90 días, se testeó la conducta de evitación pasiva (EP) y de reconocimiento de objetos (RO), así como los niveles de especies reactivas de oxígeno (ROS), la actividad de las enzimas antioxidantes catalasa (CAT) y superóxido dismutasa (SOD) y de la proteína kinasa C (PKC). Finalmente, el Hip se evaluó histológicamente. Resultados: Los resultados mostraron un aumento en las ROS a los 30 días en los Hip de los animales irradiados (Rx) con respecto a los controles (C) (pmol DCF/mg/min, C: 0.21 ± 0.02, Rx: 0.31 ± 0.01, p< 0.05) y una disminución a los 90 días (pmol DCF/mg/min, C: 0.15 ± 0.02, Rx: 0.06 ± 0.01, p< 0.05). No se encontraron cambios en CAT, mientras que la SOD se encontró disminuida a los 30 días (U/mg, C: 0.38 ± 0.01; Rx: 0.33 ± 0.01, p< 0.05) y sin cambios a los 90. La actividad de PKC se encontró aumentada en los animales irradiados a los 30 días (pmol/mg, C= 39.2 ± 1.7; Rx= 96.9 ± 10.9, p< 0.05). La histología del Hip irradiado se encontró afectada, tanto a nivel morfológico como de la citoarquitectura, la cual empeoró a los 90 días. Finalmente, se observó una mejor performance en EP de animales de 30 días (T2/T1, C: 28.9 ± 6.7; Rx: 51.6 ± 8.2 p<0.05), sin cambios a los 90. El test de RO mostró en los animales Rx un empeoramiento en la memoria de reconocimiento sólo a los 90 días (N/T, C: 0.57 ± 0.05; Rx: 0.42 ± 0.03, p<0.05). Conclusiones: Si bien se observó un daño histológico en el Hip, los resultados sugieren que el aumento de ROS y la concomitante caída de SOD a los 30 días podrían estar induciendo el aumento de PKC, favoreciendo una mejor performance en el test de EP. Estos resultados, junto con el hallazgo de un daño histológíco en el Hip y un empeoramiento de la memoria de RO, y una caída de las ROS con recuperación de los niveles de SOD observados a los 90 días, sugieren la existencia de un mecanismo plástico compensatorio para contrarrestar el ataque de ROS. Keywords: Radiaciones ionizantes - hipocampo - SOD - ROS - evitación pasivaSupported by: UBACYT M083 NEURONAL PLASTICITY IN CA1 HIPPOCAMPAL NEURONS AFTER HIPOXIA-ISCHEMIA       E. SARACENO1, L.G. CACERES2, L.R. GUELMAN2, V. BOTI3, M. KRUSE3, G VALVERDE4 , D. MADUREIRA4, L.D. GIRALDEZ ALVAREZ4, H. CORINI1,2, *F. CAPANI1; 1Human Biochem, Sch. Med. Univ. Buenos Aires, 5 F Buenos Aires, Argentina; 2 Facultad de Medicina (UBA), 1ª Cátedra de Farmacología, Buenos Aires, Argentina; 3IBYME-CONICET, Buenos Aires, Argentina; 4Univ. Federal da Bahía, Salvador, Brazil   During hypoxia episode, synaptic dysfunction observed has been related with neuronal death, although this mechanism is not fully understood yet.  In previous work we have shown modifications in neurons and synapses in the neostriatum of rat subjected to hipoxia. In this work we study the effects of hypoxia-ischemia on the actin cytoskeleton of Hippocampal CA1 post-synaptic densities (PSD) and the actin binding proteins in 30 days olds rats, by combining photooxidation, inmunofluorescent, 3D reconstruction and Western blot. In addition, we test the effects of reduced temperature from 37ºc to 15ºc on dendritic spines. Staining with phalloidin-alexa 568 followed by confocal microscopy analysis showed an increase of F actin fluorescent staining in the CA1 Hippocampal dendritic spines (Relative fluorescent intensity: control 15.1 ± 3 vs hypoxic animals 33.5 ±6 p < 0.001). Electron microscopy and 3-D reconstruction confirmed these observations showing an increment in the number of F-actin staining spines in CA1 hippocampal excitatory synapses subjected to severe hypoxia (control 2 ± 0.1 vs. hypoxic animals 3.6 ± 0.2 p < 0.001). Western blot revealed β-actin increase in hypoxic animals, consistent with the microscopy data (D.O.R: control: 1.43 ± 0.05 vs. hypoxic animals 2.98 ± 0.41 p < 0.001). Staining with profilin-alexa 488 followed by confocal microscopy analysis showed an increase of pyramidal neurons immunostaining, located in the stratum radiatum (Relative fluorescent intensity: control 20.4 ± 3 vs hypoxic animals 35.9 ± 6 p < 0.005). When hypoxia was induced under hypothermic conditions the changes observed were blocked. These results suggest that the cellular and subcellular alterations in CA1 hippocampal PSDs could be related to F-actin increase probably due to an alteration in profiling dynamic inducing more actin polymerization and changes in the dendritic synaptic cytoarchytecture.   ANPCyT 15001, PID 5782, M020.