Expresión de genes reloj en la retina del hámster dorado: ritmicidad endógena, localización e influencia de los núcleos supraquiasmáticos

DE ZAVALIA NURIA; CHIANELLI MONICA S; FERNANDEZ DIEGO C; GOLOMBEK DIEGO A; ROSENSTEIN RUTH E

Huerta Grande, Córdoba

Congreso; X Taller Argentino de Neurociencias; 2008

El principal componente del reloj biológico en mamíferos son los núcleos supraquiasmáticos (NSQ) del hipotálamo. En forma reciente se ha descripto la existencia de un reloj “periférico”, independiente del reloj central, en la retina de diversas especies. El engrama molecular del reloj involucra una serie de mecanismos de retroalimentación negativa. El modelo clásico consiste en una rama positiva, que en mamíferos está representada por el dímero CLOCK/BMAL1, capaz de activar la transcripción de diversos genes regulados circadianamente. El objetivo de este trabajo fue estudiar las variaciones circadianas de los niveles retinianos de CLOCK y BMAL1 en animales control y en animales con lesión de los NSQ, e identificar los tipos celulares retinianos en los que se expresan estos genes reloj. Para ello, se utilizaron hámsteres dorados macho control o lesionados, mantenidos en luz:oscuridad (L:D, 6 h:20 h) o en oscuridad constante (D:D) por 48 h antes del sacrificio. Se determinaron los niveles de CLOCK y BMAL1 (por Western blot) en fracción nuclear y citoplasmática de retinas de animales sacrificados a mediodía o medianoche y a mediodía o medianoche subjetivos. Los niveles nucleares de CLOCK y BMAL1 fueron significativamente mayores (p<0.05 y p<0.001, respectivamente) a mediodía que a medianoche en animales control. La variación de estos parámetros persistió en D:D (p<0.05 y p<0.01, respectivamente) tanto en animales control como en animales lesionados. No se observaron cambios diarios en los niveles citoplasmáticos de CLOCK y BMAL1 en L:D o en D:D en animales control. Se observó expresión (por inmunohistoquímica) de CLOCK y de BMAL1 sólo en las células ganglionares retinianas. Estos resultados sugieren que la expresión circadiana de Clock y de Bmal1 en la retina está regulada por un reloj local, presumiblemente localizado en las células ganglionares.