Vías de señalización involucradas en la capacitación espermática dependiente de la exclusión de AMPc en bovinos

ALONSO CAI, CASTELLANO L, OSYCKA-SALUT CEDAVIO C, PÉREZ MARTINEZ S

Mar del Plata

Congreso; LX REUNIÓN DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC); 2015

La capacitación espermática (CE) es un proceso necesariopara que el espermatozoide (ESP) adquiera capacidad fecundante.La misma implica un complejo diálogo molecular que incluyecambios en la fluidez de membrana, incremento de Ca2+ y AMPcy activación de kinasas. En otros tipos celulares, en condicionesfisiológicas y patológicas el AMPc es excluido por proteínas deresistencia a multidrogas (MRPs), en particular MRP4, regulandola homeostasis celular. Resultados obtenidos en nuestrolaboratorio indican que frente a una concentración moderada debicarbonato en el medio (40 mM), los ESP bovinos sufren unproceso de exclusión de AMPc vía el transportador MRP4 quees crítico para la CE. A su vez, el AMPc extracelular actúa sobreel receptor A1 activando vías de señalización intracelulares quedependen de una PLC y de la adenilato ciclasa soluble. Es por elloque en el presente trabajo nos propusimos ahondar en las víasde señalización involucradas en la CE inducida por bicarbonatoo AMPc. Para ello se llevaron a cabo capacitaciones in vitro conbicarbonato (40 mM) o AMPc (10 nM), en ausencia o presenciade diferentes inhibidores farmacológicos. Alícuotas de ESP fueronseparadas para evaluar el estado de capacitación mediante latécnica de CTC. Por otro lado se extrajeron proteínas totales paraevaluar el estado de fosforilación de sustratos de PKA (pPKA),residuos de tirosina (pTyr), o ERK1/2. Los resultados indican queel bicarbonato y el AMPc incrementan pPKA y pTyr, mostrandodiferentes perfiles de activación en el tiempo (p