CEFYBO   02669
CENTRO DE ESTUDIOS FARMACOLOGICOS Y BOTANICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Los receptores musarínicos como oncoproteínas: su rol en la tumorigénesis mamaria.
Autor/es:
MARTINEZ PULIDO P; LOMBARDI G,; SALES ME
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; Jornada de Oncología Experimental. Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC).; 2015
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
Los receptores muscarínicos (M) son componentes del sistema colinérgico y pueden expresarse en células de origen no nervioso regulando tanto funciones fisiológicas como patológicas. En este sentido, se ha reportado la sobreexpresión de los receptores M en tumores de diverso origen y su participación en distintas etapas de la tumorigénesis. En nuestro laboratorio demostramos la expresión de estos receptores en tumores mamarios murinos y en células de la línea MCF-7 derivadas de un adenocarcinoma mamario humano luminal y su ausencia en células no tumorigénicas mamarias humanas MCF-10A. Además, observamos que la activación de los receptores M aumenta la proliferación, la migración celular y la angiogénesis in vivo de las células MCF-7. El objetivo de nuestro trabajo fue evaluar si la expresión de los subtipos 3 y 4 de los receptores M en las células MCF-10A promueve la transformación celular hacia un fenotipo tumoral. Para esto generamos por transfección una línea celular que expresa estos subtipos de receptores, que denominamos MCF-10A-M3M4. En esta línea estudiamos el efecto de la activación colinérgica sobre el ciclo celular y la migración celular in vitro, así como la respuesta angiogénica y el crecimiento tumoral in vivo. Comprobamos que la línea celular MCF-10A-M3M4 expresa los transcriptos y las proteínas para los receptores M3 y M4. Observamos que el tratamiento con el agonista carbacol incrementó el porcentaje de células en fase S/G2/M en estas células con respecto al control y que este efecto se revierte en presencia del antagonista muscarínico no selectivo atropina. También demostramos que el carbacol incrementó la capacidad migratoria y la expresión de metaloproteinasa-9 (MMP-9) en las células MCF-10A-M3M4 de manera comparable a lo observado en las células tumorales MCF-7, mientras que no tuvo efecto sobre las células MCF-10A. Estos efectos se redujeron tanto en presencia de atropina como de los antagonistas selectivos de los subtipos M3 y M4, 4-DAMP y tropicamida respectivamente. Además, las células MCF-10A-M3M4 generaron una respuesta angiogénica positiva en un modelo xenogeneico en ratones NUDE, de magnitud comparable con las células MCF-7. Además, las células transfectadas adquirieron la capacidad de sintetizar el factor de crecimiento del endotelio vascular-A (VEGF-A), promotor de la neovascularización. Finalmente determinamos que las células de la línea MCF-10A-M3M4, forman tumores en ratones NUDE de manera semejante a las células MCF-7, mientras que las células MCF-10A carecen de esta capacidad. Concluimos que la expresión de uno o más subtipos de los receptores M en células de mama humana no tumorigénicas es suficiente para aumentar la proliferación, la migración e inducir la síntesis de novo de MMP-9 y VEGF-A in vitro y adquirir la capacidad de inducir neovascularización y formar tumores in vivo.