Metabolismo dela arginina por el sistema óxido nítrico sintasa/arginasa en fibroblastos murinos normales y tumorales. Regulación por el sistema colinérgico no neuronal

ESPAÑOL ALEJANDRO; NEGRONI, PIA; SALES MARÍA ELENA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; 52 va Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Se ha documentado que la inflamación crónica está asociada con patologías como la diabetes, la aterosclerosis o el cáncer. En este trabajo nos proponemos investigar en forma comparativa en fibroblastos murinos normales NIH3T3 tratados con lipopolisacárido de E. coli (10 ng/ml) e interferón gama (0,5 ng/ml) (LPS+IFNg) (NIH3T3*) y en fibroblastos murinos tumorales SCA-9, el metabolismo de la arginina por las enzimas óxido nítrico sintasa (NOS)/arginasa (A) y la modulación del mismo por el sistema colinérgico no neuronal (SCnN). Las células NIH3T3* producen mayores concentraciones de óxido nítrico (NO) medido como nitritos (NO2- mM/104 cél.) (12,40±0,59; n=12) que las SCA-9 (4,02±0,74; n=8). El efecto se revertió por el agregado de atropina (AT) (10-5M). Por Western blot demostramos que la isoforma NOS1 está expresada en las células NIH3T3*, mientras que las 3 isoformas de NOS se expresan en las células SCA-9.  El tratamiento con el agonista colinérgico carbacol (CARB) (10-9M) aumentó significativamente la producción de nitritos tanto en NIH3T3* (16,22±0,46; n=8) como en las células SCA-9 (6,91±1,05; n=8). La arginina también es metabolizada por la enzima arginasa en ambos tipos celulares, pero mientras que las células NIH3T3* expresan sólo la isoforma AII las células tumorales expresan AI>AII. La producción de urea (mmoles/106 cél.) fue significativamente mayor en éstas últimas (69,22±29,68; n=8) con respecto a las NIH3T3* (30,30±1,63; n=8). El CARB estimuló la actividad de arginasa tanto en NIH3T3* (60,79±7,52; n=8) como en las SCA-9 (188,19±11,03; n=8) efecto que fue revertido por AT. Concluimos que el metabolismo de la arginina es modulado por el SCnN diferencialmente en estas células: la vía NOS es preponderante en las células normales en un entorno inflamatorio mientras que en las células tumorales la arginina es principalmente metabolizada por arginasas que aportarían sustratos para la síntesis de poliaminas necesarias para la proliferación celular.