La proteína ADN adenina metiltransferasa participa en la regulación de la síntesis del lipopolisacárido en Salmonella enterica serovar Enteritidis

SARNACKI SH, MAROLDA CL, NOTO LLANA M, GIACOMODONATO MN, VALVANO MA, CERQUETTI, MC.

Córdoba, Argentina.

Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología; 2007

Asociación Argentina de Microbiología

La proteína DNA adenina metiltransferasa (Dam) es un regulador global de la expresión génica en bacterias y modula una gran variedad de procesos incluyendo la replicación de ADN, reparación por “mismatch” y transcripción génica. Hemos observamos que la mutante dam de Salmonella enterica serovar Enteritidis (SEDdam) tiene un defecto parcial en la distribución del largo del antígeno polisacarídico O (Ag O).  Este hallazgo sugiriere que la proteína Dam modula en forma directa o indirecta la función codificada por el gen wzz.  El producto de este gen es una proteína (Wzz) relacionada en la regulación del largo de cadena del Ag O del lipopolisacárido (LPS).  Mediante el uso de Western blot y densitometría se cuantificó la proteína Wzz en la cepa delecionada en el gen dam y en la cepa salvaje de S. Enteritidis.  Los resultados indicaron que la mutante SEDdam produce de 3 a 6 veces menos cantidad de Wzz que la cepa parental, sugiriendo que Dam podría estar involucrada en la regulación de la síntesis de esta proteína en S. Enteritidis.  Dado que la expresión del gen wzz está regulado por rcsB y pmrA, se construyeron cepas SEDdam sobreproductoras de las proteínas RcsB y PmrA para investigar la producción de Ag O del LPS.  Los genes rcsB y pmrA fueron clonados en plásmidos pUC18 y electroporados en las cepas SEDdam y salvaje.  El patrón del Ag O del LPS de la mutante SEDdam sobreproductora de RcsB mostró ser similar al de la cepa salvaje.  Sin embargo, la sobreexpresión de PmrA en la mutante SEDdam no modificó su defecto en el largo de cadena del LPS.  Nuestros resultados demuestran que la proteína Dam está involucrada en la síntesis del LPS de S. Enteritidis mediante la regulación de la síntesis de la proteína Wzz.  Más aún, nuestros hallazgos sugieren que esta regulación es dependiente del sistema de dos componentes RcsC/YojN/RcsB e independiente del sistema PmrA/PmrB.