Efecto modulador de la leptina sobre la actividad de las metaloproteasas ováricas y sus inhibidores tisulares durante el proceso ovulatorio de la rata

MARÍA GUILLERMINA BILBAO; MARÍA PAULA DI YORIO; SOLANGE MARINE NÚÑEZ; ALICIA GRACIELA FALETTI

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La leptina, proteína codificada por el gen de la obesidad y sintetizada principalmente por el tejido adiposo, es capaz de ejercer efectos bifásicos sobre la función ovárica, dosis dependiente. Las metaloproteasas (MMPs) son enzimas que degradan la matriz extracelular y son activadas durante el desarrollo folicular y la ovulación. El propósito de esta trabajo fue estudiar el efecto de la leptina sobre la actividad de las principales MMPs ováricas (MMP2 y MMP9) durante el proceso ovulatorio. Para ello realizamos cultivos de explantes de ovarios de ratas inmaduras estimuladas con gonadotrofinas en presencia de leptina (0.3-500 ng/ml). Por Western Blot (WB), se detectó la expresión de las MMPs de masa molecular relativa de 65 y 82 kDa correspondiente a las MMPs activas 2 y 9 respectivamente, y de 72 kDa correspondiente a la forma latente inactiva de la MMP2. Como la leptina no modificó el contenido de ninguna de estas proteínas, estudiamos la actividad gelatinolítica de estas MMPs secretadas al medio de incubación por zimografía, utilizando gelatina como sustrato. Observamos que la actividad más abundante fue detectada para MMP9, pero la actividad de ambas MMPs aumentaron en presencia de bajas concentraciones de leptina cuya máxima respuesta fue obtenida con 10 ng/ml (MMP2: 92% y MMP9: 98%, p<0.01). Como la acción de estas enzimas está regulada por inhibidores tisulares (TIMPs), estudiamos el contenido proteico de estos inhibidores tisulares por WB. Detectamos la presencia de TIMP-1, TIMP-2 y TIMP-3 correspondientes a las bandas de 31, 21 y 25 kDa, respectivamente. A su vez la leptina aumentó de 7 a 10 veces el contenido proteico de estos inhibidores, con máxima respuesta en presencia de 10 ng/ml de leptina (p<0.01), sin respuesta a mayores concentraciones. Estos resultados indican que la leptina podría estar activamente involucrada en la ruptura folicular por modular la actividad de las metaloproteasas ováricas y sus inhibidores tisulares.