Efecto de la leptina sobre las metaloproteasas ováricas durante el proceso ovulatorio de la rata

MARÍA PAULA DI YORIO; MARÍA CAROLINA PUSTOVRH; MARÍA GUILLERMINA BILBAO; ALICIA GRACIELA FALETTI

Buenos Aires

Congreso; XX Reunión Bienal de la Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproducción Humana; 2007

Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproducción Humana (ALIRH)

La leptina, proteína codificada por el gen de la obesidad y sintetizada principalmente por el tejido adiposo, además de regular el apetito y el gasto energético, parece intervenir directamente en la función ovárica. En estudios previos demostramos que el tratamiento con altas dosis de leptina producía efectos inhibitorios sobre el proceso ovulatorio y bajas dosis inducían la ovulación. Las metaloproteasas (MMPs) son enzimas encargadas de degradar la matriz extracelular y son activadas durante el desarrollo folicular y la ovulación. La acción de estas enzimas es el resultado de un equilibrio entre inhibidores tisulares y factores inductores de su actividad, entre los que podemos mencionar a las gonadotrofinas y las hormonas esteroideas. El propósito de esta trabajo fue estudiar si el efecto de la leptina sobre la función ovárica estaba relacionada con la actividad de las principales MMPs ováricas (MMP2 y MMP9) durante el proceso ovulatorio. Para ello realizamos cultivos de explantes de ovarios de ratas inmaduras estimuladas con gonadotrofinas expuestos a distintos niveles de leptina (0.3-500 ng/ml) durante 4 horas. Por Western Blot (WB), se detectó la expresión de las MMPs con masa molecular relativa de 65 y 82 kDa correspondiente a las MMPs activas 2 y 9 respectivamente, y de 72 kDa correspondiente a la forma latente inactiva de la MMP2. Al observar que la presencia de leptina no modificó la expresión de ninguna de estas proteínas a ninguna de las concentraciones ensayadas, estudiamos la actividad gelatinolítica de estas MMPs secretadas al medio de incubación por zimografía, utilizando gelatina como sustrato. Por densitometría observamos que la actividad más abundante fue detectada para MMP9, pero la actividad de ambas MMPs aumentaron en presencia de bajas concentraciones de leptina cuya máxima respuesta fue obtenida con 10 ng/ml (MMP2: 145% y MMP9: 150%, ambas respecto al control, p<0.05). Como la leptina puede tener efecto dual sobre la función ovárica, estudiamos la expresión de sus receptores (OB-R) en el tejido por WB y la concentración de progesterona (Pg) en el medio de incubación por radioinmunoensayo específico. En presencia de bajas concentraciones de leptina se observó aumento en la expresión ovárica de OB-R (110% respecto a los controles, p<0.05) y en la producción de Pg (31±2 vs 24±4). Estos resultados indican que la leptina y sus receptores podrían estar activamente involucrados en la ruptura folicular por modular la actividad de las metaloproteasas ováricas.