RESCATE DEL CUERPO LÚTEO TARDIO POR hGC: ANÁLISIS DE GRUPOS GÉNICOS FUNCIONALES MEDIANTE EL USO DE MICROARREGLOS DE ADN

PUSTOVRH C; ARRIAGADA C; ÚRZUA U; MUÑOZ A; KOHEN P; DEVOTO L

Valdivia, Chile

Congreso; XVIII CONGRESO CHILENO DE ENDOCRINOLOGIA Y DIABETES 2007; 2007

Sociedad Chilena de Endocrinología y Diabetes

La regresión lútea es un proceso complejo que requiere la expresión coordinada de un gran número de genes implicados en cambios tanto funcionales como estructurales. Objetivo: Estudiar el perfil global de expresión génica en el cuerpo lúteo tardío (CLT) en la regresión lútea natural y bajo el estímulo de hCG (CLT+hCG). Metodología: Se obtuvo CL en fase lútea tardía provenientes de mujeres fértiles con y sin tratamiento de hGC 10000 UI im 24 h previo cirugía. Protocolo aprobado por el comité de ética del CSSBA. Se extrajo RNA total del tejido, el que fue convertido a cDNA con la mezcla apropiada de nucleótidos fluorescentes Alexa-555 y 647 para CLT y CLT+hCG respectivamente e hibridados a 42º C sobre un portaobjeto con microarreglos de 48.910 genes humanos (HEEBO). Se generó la grilla de datos con el programa bioinformático Gene Pix. Posteriormente, los datos se normalizaron con el programa Gene Expression Pattern Análisis y el estudio funcional se realizó mediante el empleo de FAtiGO, IDconverter y Entrez Gene. Resultados: Se observó que 249 genes (un total de 0,69 %) exhibieron un cambio en su expresión en CLT+hCG ³ 2 veces, de los cuales 87 genes resultaron sobreexpresados y 162 reprimidos respecto a CLT. Aquellos genes que presentaron mayor tasa de cambio en CLT+hCG fueron: TAF4 RNA polymerase II, ATP citrate lyase, HMG-CoA reductase, TPST1, GH1, IGFBP1, ARSG, UVRAG, LIG4, LTV1, BAG2, API5. La asociación funcional de los genes según FAtiGO mostró que la administración de hCG al CL tardío produjo un incremento en la expresión de reguladores de la actividad transferasa, GTPasa y oxidoreductasa, y disminuyen aquellos genes involucrados con la regulación de la unión nucleotídica y actividad hidrolasa. Conclusión: La administración de hCG es capaz de producir modificaciones a nivel de la expresión génica implicada en el rescate funcional de la estereidogénesis, actividad mitogénica y sobrevida celular en el CLT. Estos datos son consistentes con recientes hallazgos donde hCG detiene procesos apoptóticos de las células lúteas. Estudios específicos sobre los genes modificados por la acción de esta hormona permitirán determinar los mecanismos involucrados en el rescate de la función lútea. (FONDAP 15010006;  # Fogarty Grant RFA-TW-05-002)