CEFYBO   02669
CENTRO DE ESTUDIOS FARMACOLOGICOS Y BOTANICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
EFECTO DE LA LEPTINA SOBRE LAS METALOPROTEASAS
Autor/es:
DI YORIO P; PUSTOVRH C; BILBAO M; FALETTI A.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XX Reunión Bienal Asociación Latinoamericana de Investigación en Reproducción Humana; 2007
Institución organizadora:
Asociación Latinoamericana de Investigación en Reproducción Humana
Resumen:
La leptina, proteína codificada por el gen de la obesidad y
sintetizada principalmente por el tejido adiposo, además de regular
el apetito y el gasto energético, parece intervenir directamente
en la función ovárica. En estudios previos demostramos
que el tratamiento con altas dosis de leptina producía efectos
inhibitorios sobre el proceso ovulatorio y bajas dosis inducían la
ovulación. Las metaloproteasas (MMPs) son enzimas encargadas
de degradar la matriz extracelular y son activadas durante
el desarrollo folicular y la ovulación. La acción de estas enzimas
es el resultado de un equilibrio entre inhibidores tisulares y factores
inductores de su actividad, entre los que podemos mencionar
a las gonadotrofinas y las hormonas esteroideas. El propósito
de esta trabajo fue estudiar si el efecto de la leptina sobre
la función ovárica estaba relacionada con la actividad de las
principales MMPs ováricas (MMP2 y MMP9) durante el proceso
ovulatorio. Metodología: Se realizaron cultivos de explantes de
ovarios de ratas inmaduras estimuladas con gonadotrofinas expuestos
a distintos niveles de leptina (0,3-500 ng/ml) durante 4
horas. Se determinó el contenido de MMPs y del receptor de
leptina en el tejido ovárico por western blot (WB), y la actividad
gelatinolítica de las MMPs secretadas al medio de incubación por
zimografía utilizando gelatina como sustrato. Se cuantificó
progesterona (Pg) en el medio de incubación por radioinmunoensayo
específico. Resultados y conclusiones: Se detectó la expresión
de las MMPs con masa molecular relativa de 65 y 82 kDa
correspondiente a las MMPs activas 2 y 9 respectivamente, y de
72 kDa correspondiente a la forma latente inactiva de la MMP2.
Al observar que la presencia de leptina no modificó la expresión
de ninguna de estas proteínas a ninguna de las concentraciones
ensayadas, estudiamos la actividad gelatinolítica de estas
MMPs secretadas al medio de incubación. Por densitometría
observamos que la actividad más abundante fue detectada para
MMP9, pero la actividad de ambas MMPs aumentaron en presencia
de bajas concentraciones de leptina cuya máxima respuesta
fue obtenida con 10 ng/ml (MMP2: 145% y MMP9: 150%,
ambas respecto al control, p<0.05). Como la leptina puede tener
efecto dual sobre la función ovárica, estudiamos la expresión de
sus receptores (OB-R) en el tejido por WB y la concentración de
progesterona (Pg) en el medio de incubación. En presencia de
bajas concentraciones de leptina se observó aumento en la expresión
ovárica de OB-R (110% respecto a los controles, p<0.05)
y en la producción de Pg (31±2 vs 24±4). Estos resultados indican
que la leptina y sus receptores podrían estar activamente
involucrados en la ruptura folicular por modular la actividad de
las metaloproteasas ováricas.Metodología: Se realizaron cultivos de explantes de
ovarios de ratas inmaduras estimuladas con gonadotrofinas expuestos
a distintos niveles de leptina (0,3-500 ng/ml) durante 4
horas. Se determinó el contenido de MMPs y del receptor de
leptina en el tejido ovárico por western blot (WB), y la actividad
gelatinolítica de las MMPs secretadas al medio de incubación por
zimografía utilizando gelatina como sustrato. Se cuantificó
progesterona (Pg) en el medio de incubación por radioinmunoensayo
específico. Resultados y conclusiones: Se detectó la expresión
de las MMPs con masa molecular relativa de 65 y 82 kDa
correspondiente a las MMPs activas 2 y 9 respectivamente, y de
72 kDa correspondiente a la forma latente inactiva de la MMP2.
Al observar que la presencia de leptina no modificó la expresión
de ninguna de estas proteínas a ninguna de las concentraciones
ensayadas, estudiamos la actividad gelatinolítica de estas
MMPs secretadas al medio de incubación. Por densitometría
observamos que la actividad más abundante fue detectada para
MMP9, pero la actividad de ambas MMPs aumentaron en presencia
de bajas concentraciones de leptina cuya máxima respuesta
fue obtenida con 10 ng/ml (MMP2: 145% y MMP9: 150%,
ambas respecto al control, p<0.05). Como la leptina puede tener
efecto dual sobre la función ovárica, estudiamos la expresión de
sus receptores (OB-R) en el tejido por WB y la concentración de
progesterona (Pg) en el medio de incubación. En presencia de
bajas concentraciones de leptina se observó aumento en la expresión
ovárica de OB-R (110% respecto a los controles, p<0.05)
y en la producción de Pg (31±2 vs 24±4). Estos resultados indican
que la leptina y sus receptores podrían estar activamente
involucrados en la ruptura folicular por modular la actividad de
las metaloproteasas ováricas.Resultados y conclusiones: Se detectó la expresión
de las MMPs con masa molecular relativa de 65 y 82 kDa
correspondiente a las MMPs activas 2 y 9 respectivamente, y de
72 kDa correspondiente a la forma latente inactiva de la MMP2.
Al observar que la presencia de leptina no modificó la expresión
de ninguna de estas proteínas a ninguna de las concentraciones
ensayadas, estudiamos la actividad gelatinolítica de estas
MMPs secretadas al medio de incubación. Por densitometría
observamos que la actividad más abundante fue detectada para
MMP9, pero la actividad de ambas MMPs aumentaron en presencia
de bajas concentraciones de leptina cuya máxima respuesta
fue obtenida con 10 ng/ml (MMP2: 145% y MMP9: 150%,
ambas respecto al control, p<0.05). Como la leptina puede tener
efecto dual sobre la función ovárica, estudiamos la expresión de
sus receptores (OB-R) en el tejido por WB y la concentración de
progesterona (Pg) en el medio de incubación. En presencia de
bajas concentraciones de leptina se observó aumento en la expresión
ovárica de OB-R (110% respecto a los controles, p<0.05)
y en la producción de Pg (31±2 vs 24±4). Estos resultados indican
que la leptina y sus receptores podrían estar activamente
involucrados en la ruptura folicular por modular la actividad de
las metaloproteasas ováricas.