CEFYBO   02669
CENTRO DE ESTUDIOS FARMACOLOGICOS Y BOTANICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Participación de Sirt6 en la fisiopatología retiniana. Mecanismos epigenéticos de regulación del transportador de glucosa tipo1 (GLUT-1).
Autor/es:
DM SILBERMAN; K ROSS; P.SANDE; S KUBOTA; S RAMASWAMY; RS APTE; MOSTOSLAVSKY R
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIX REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La retina de mamíferos es un tejido de gran actividad metabólica y uno de los que más energía consumen. El movimiento de glucosa a través de la barrera hematoencefálica ocurre por el transportador de glucosa tipo 1 (GLUT1). SIRT6, una desacetilasa de histonas, regula epigenéticamente la actividad de genes glucolíticos clave, como GLUT1. Dada la implicancia de la regulación de la homeostasis de la glucosa en el desarrollo de enfermedades metabólicas y la falta de antecedentes que involucren a SIRT6 en la fisiopatología retiniana, el objetivo de este trabajo fue caracterizar SIRT6 en la retina de ratón y estudiar su participación en la regulación de GLUT1. Se analizaron los niveles de ARNm por RT-PCR y proteicos por Western blot en extractos de cromatina de retina de ratones C57B6 y se analizó su actividad determinando los niveles de acetilación de H3K9 y H3K56. Se observaron niveles detectables de SIRT6 a nivel del ARNm y a nivel proteico. Los niveles reducidos de acetilación de H3K56 y de H3K9 demostraron que la enzima es activa en el tejido. Se determinó la localización de SIRT6 por hibridación in situ y se observó su presencia en los núcleos de las células de todas la capas de la retina. Se estudió el efecto del bloqueo global de SIRT6 analizando los niveles proteicos, de ARNm y su actividad en animales KO para SIRT6. Las retinas de los animales KO no presentaron niveles detectables de ARNm ni de proteína y presentaron niveles significativamente mayores de acetilación de H3K56 y de H3K9 respecto de los WT (p< 0,001 y p< 0,01 respectivamente) lo que confirma que estas lisinas son sustrato específico de SIRT6 en la retina. Además, se observó una regulación positiva de GLUT1 por Western blot (p< 0,01), PCR (p< 0,01) e inmunofluorescencia en ratones KO. El estudio electrorretinográfico demostró que la función visual está afectada en estos animales sugiriendo que la disponibilidad de glucosa en la retina de ratones KO estaría alterada comprometiendo la función visual.