La activación de receptores colinérgicos M3 y M1 estimula la proliferación de células tumorales de mama humana

MIDDONNO CRISTINA; FISZMAN GABRIEL; DE LA TORRE EULALIA; ESPAÑOL ALEJANDRO; SALES MARÍA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LI Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos la presencia de receptores colinérgicos muscarínicos (RCM) en células provenientes de líneas de adenocarcinomas mamarios murinos. La activación de dichos receptores promueve la progresión tumoral. En este trabajo nos proponemos estudiar la expresión y función de los RCM en células tumorales de mama  humana MCF-7. Por ensayos de Western blot (Wb) en lisados celulares, demostramos la expresión de los subtipos M3 >M4 >>M1=M5 y ausencia del receptor M2. El tratamiento de las células MCF-7 con el agonista carbacol (CARB) 10-9M estimuló significativamente la proliferación con respecto al control sin tratamiento (55%, p<0,05; n=5). El pretratamiento de las células con el antagonista no selectivo atropina (AT) o metabromuro de 4-difenilacetoxi-N-metil-piperidina (4-DAMP) antagonista M3 redujo totalmente el efecto del agonista, mientras que la pirenzepina (PIR), antagonista M1, produjo una inhibición parcial. Para estudiar la vía de señalización acoplada a la activación muscarínica, tratamos las células con 4-carboxifenil-N,N- difenilcarbamato (NCDC) inhibidor de fosfolipasa C, H-7, inhibidor de proteína quinasa C y NG-monometil-L-arginina (L-NMMA) inhibidor de óxido nítrico sintasa (NOS), los que redujeron significativamente el efecto proliferativo del agonista (18%; 2,3% y 4% respectivamente) (p<0,05; n=3). El CARB estimuló la actividad de NOS medida como producción de nitrito (umol/106 cél) (4,59±0,23; n=3) con respecto al basal (1,76±0,09; n=3). El efecto se revirtió en presencia de AT, PIR y 4-DAMP. Por Wb demostramos la expresión de NOS1 y NOS3 en células MCF-7. Concluimos que la activación de receptores M3 y M1 promueven la proliferación celular vía NOS, en estas células de mama humana.