El flavonoide prenilado 6PP inhibe la respiración mitocondrial e induce citotoxicidad

MP ISOLABELLA, ELINGOLD I, CASANOVA MB, CELENTANO AM, PEREZ C, DIEZ R, CABRERA JL, DUBIN M

Mar del Plata

Congreso; LI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

SAIC

EL FLAVONOIDE PRENILADO 6PP INHIBE LA RESPIRACIÓN MITOCONDRIAL E INDUCE CITOTOXICIDAD   M. Paula Isolabella1, I. Elingold2, Ana María Celentano3, Cristina Pérez4, Marta Casanova2, JL Cabrera5, RA Diez1, Marta Dubin2. Dpto de Farmacología (1), CEFYBO UBA-CONICET (2), y Dpto de Microbiología (3), Facultad de Medicina, Cátedra de Farmacología (4), Facultad de Odontología (UBA) y Farmacognosia (5), Facultad de Ciencias Químicas (UNC).   Los flavonoides tienen efectos inhibitorios sobre las actividades de enzimas como los citocromos P-450 involucrados en la activación de procarcinógenos, y enzimas de la fase 2 comprometidas en la detoxificación de éstos. A partir de la Dalea elegans, planta leguminosa argentina, se aisló la flavanona, 2´-4´-dihidroxi-5´-(1´´´-dimetilalil)-6-prenilpinocembrina (6PP), con dos grupos prenilos que lo distinguen de otros flavonoides. Estudios previos mostraron  la eficacia del 6PP contra cepas bacterianas multirresistentes intrahospitalarias. El objetivo de nuestro trabajo fue evaluar la toxicidad de este flavonoide. La velocidad de respiración se midió polarográficamente en una suspensión de mitocondrias, aisladas de hígado de rata. La adición del 6PP estimuló el consumo de oxígeno en estado 4 e inhibió en estado 3 a  50 y 100 mM, p<0,01, en presencia de malato-glutamato como sustrato respiratorio. Como consecuencia disminuyó el índice de control respiratorio (ICR) a  partir de 12,5 mM, p<0,01. Con succinato como sustrato, el flavonoide inhibió el consumo de oxígeno en estado 4 a 100mM, p<0,01. En estado 3 inhibió a partir de 12,5 mM, p<0,01. El ICR disminuyó a partir de 12,5 mM, p<0,01. En mitocondrias acopladas la actividad ATPasa disminuyó 37,2% a 50 mM, p<0,01 y  51%  a 100 mM, p<0,01; en partículas submitocondriales disminuyó un 46% a 100 mM, p<0,01. Se midió acción citotóxica del 6PP por reducción de MTT en células HEp-2. El ensayo se realizó en presencia y ausencia de albúmina 0,5%. Luego de la incubación con 6PP durante 24 hs sin albúmina, se observó una disminución del 60% de la viabilidad celular a concentraciones superiores a 10 mM, p<0,01. En el ensayo con albúmina hubo disminución significativa entre 200 y 400mM, p<0,01. Los resultados obtenidos sugieren un efecto inhibitorio de la cadena de transporte de electrones y/o un efecto desacoplante de la fosforilación oxidativa. Se postula la mitocondria como blanco de la citotoxicidad del 6PP.