Activación del sistema colinérgico no neuronal en células NIH3T3 tratadas con inflamógenos

ESPAÑOL ALEJANDRO; FISZMAN GABRIEL; GOREN NORA; FRANCHI ANA; SALES MARÍA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; 51 Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

SAIC-SAI

Se ha documentado que la inflamación crónica está asociada con patologías como la diabetes, la aterosclorosis o el cáncer. Hemos demostrado que la activación del sistema colinérgico no neuronal promueve la progresión tumoral. Nos proponemos estudiar el efecto de la activación colinérgica en fibroblastos murinos normales, NIH3T3, en ausencia o en presencia de una combinación de diferentes combinaciones de lipopolisacárido de E. coli con interferón gama (LPS+IFN) agregado al cultivo durante 24 hs. por Western blot comprobamos que LPS+IFN induce un incremento de la expresión de CD40, un marcador de inflamación, en células NIH3T3. El tratamiento con LPS+IFN estimuló la acumulación de nitrito (uM) en el sobrenadante de cultivo en forma concentración dependiente, siendo la concentración más efectiva LPS 10 ng/ml con IFN gama 0.5 ng/ml (12.5±0.59) con respecto a las céluls sin tratamiento (4.95±0.48) (p<0.001). El agregado del agonista colinérgico muscarínico carbacol (CARB) produjo un incremento de la acumulación de nitrito en forma concentración dependiente, siendo la dosis efectiva máxima 10-9M en las células tratadas con LPS+IFN (14.52±0.46) y 10-8M en las células no tratadas (6.77±0.8) (p<0.05). El efecto del CARB fue más eficaz en las células no tratadas (37%) que en las tratadas con LPS+IFN (17%)  p<0.05 con respecto al control sin CARB. La estimulación producida por CARB se redujo con atropina (10-5M9 o con el inhibidor de la óxido nítrico cintaza (NOS) NG-monometil N-arginina (10-4M) tanto en células no tratadas (3.48±0.85) como en tratadas con LPS+IFN (7.16±1.30) p<0.001. Además el efecto estimulante del CARB en las células con LPS+IFN se redujo por la preincubación con indometacina (10-6M) (8.66±0.76) p<0.001. Concluimos que en las células NIH3T3, el tratamiento con flogógenos como LPS+IFN incrementa la sensibilidad de la respuesta al CARB, medida como producción de nitrito, efecto que estaría mediado por los productos de ciclooxigenasa.